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天然抗菌肽分離純化方法的建立
目的 尋找高效、廣譜的新型天然抗菌肽,建立穩(wěn)定、有效的分離純化方法.方法 家蠅免疫誘導后制成組織勻漿,經(jīng)超速離心、分子篩過濾、Sephadex G50層析、反相高效液相色譜法(RP-HPLC)、透析濃縮等技術進行分離純化,用K-B法鑒定抗菌活性.結果 組織提取液經(jīng)超速離心后,用pH 6.8 Tris-HCl尿素緩沖液作流動相,Sephadex G50層析,收集到有明顯抗菌活性的成分.再用pH 6.8磷酸鹽緩沖液作流動相,經(jīng)RP-HPLC半制備柱進一步純化,各成分分離效果良好,保留時間為18.008 min處的譜峰,有明顯的抗菌活性.用RP-HPLC分析柱顯示其為單一成分,達到了色譜純.該抗菌肽對大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin-resistant S.aureus,MRSA)均有抗菌活性.結論 建立了有效的家蠅抗菌肽分離純化方法,純化的家蠅抗菌肽有廣譜抗菌活性.
作 者: 周義文 申萍 涂植光 尹一兵 陳輝 孟江萍 王小中 盧亮 陳如山 陳正庚 作者單位: 周義文(廣東省深圳市孫逸仙心血管醫(yī)院,518021)申萍,盧亮,陳如山,陳正庚(廣東省深圳市第二人民醫(yī)院藥劑科,518035)
涂植光,尹一兵,陳輝,孟江萍,王小中(重慶醫(yī)科大學檢驗系,400016)
刊 名: 國際檢驗醫(yī)學雜志 ISTIC 英文刊名: INTERNATIONAL JOURNAL OF LABORATORY MEDICINE 年,卷(期): 2007 28(9) 分類號: Q2-33 關鍵詞: 家蠅抗菌肽 抗菌活性 純化 方法學【天然抗菌肽分離純化方法的建立】相關文章:
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