用一個簡單快速的RT-PCR技術(shù)篩選白細胞介素－6作用相關(guān)基因

為了研究白細胞介素-6(IL-6)作用相關(guān)基因以及一些可能受IL-6調(diào)控的基因，利用一個簡單快速的以PCR為基礎(chǔ)的方案，檢測了IL-6處理和未處理的Sko007細胞中基因表達的差異，克隆并鑒定了差異表達基因的cDNA片段.首先用6-mer寡核苷酸引物進行反轉(zhuǎn)錄從而最大限度地將mRNA編碼區(qū)序列生成cDNA；然后用2或3個較長的隨機引物進行PCR擴增，并以不同引物組合重復(fù)PCR增擴；擴增產(chǎn)物在2%瓊脂糖凝膠上電泳分離，回收差異片段并直接用于克隆、測序及進一步分析.在此研究中，獲得了3個表達序列標簽(EST)，其中一個為新的基因片段，反向RNA雜交有力證實了它們與IL-6作用的相關(guān)性.進一步的生物信息學(xué)分析表明，新基因片段STRF17在多種組織中表達.

作 者： 黃耀江 王關(guān)林 黎燕 施明 王建安 胡美茹 沈倍奮   作者單位： 黃耀江,王關(guān)林(大連理工大學(xué)生化工程研究所,)

黎燕,施明,王建安,胡美茹,沈倍奮(北京基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所,) 

刊 名： 生物化學(xué)與生物物理進展  ISTIC SCI PKU 英文刊名： PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS  年，卷(期)： 2001 28(4)  分類號： Q939  關(guān)鍵詞： 白細胞介素-6   差異表達基因   骨髓瘤細胞  

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