小鼠睫狀神經營養(yǎng)因子基因的克隆及真核表達載體的構建

目的:分別構建野生型和截短型小鼠睫狀神經營養(yǎng)因子(CNTF)基因的真核表達載體.方法:通過逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)擴增小鼠CNTF野生型全長編碼序列,體外定點突變獲取截短型CNTF的互補DNA(cDNA)編碼序列,將上述兩序列分別克隆至pGEM-TEasy載體,經限制性內切酶EcoRⅠ和XbaⅠ雙酶切后,將野生型和截短型CNTF基因連入pTracer-CMV真核表達載體,DNA測序鑒定.結果:PCR成功擴增了野生型和截短型CNTF基因,DNA序列分析證實兩種真核表達載體中的CNTF序列與Gene Bank中目的序列一致.結論:野生型和截短型CNTF基因真核表達載體的成功構建為視網膜色素變性(RP)的基因治療研究奠定了基礎.

作 者： 袁松濤 左愛軍 李寧東 梁東春 趙堪興 YUAN Songtao ZUO Aijun LI Ningdong LIANG Dongchun ZHAO Kanxing   作者單位： 袁松濤,YUAN Songtao(300070,天津醫(yī)科大學;天津市眼科醫(yī)院)

左愛軍,梁東春,ZUO Aijun,LIANG Dongchun(天津市內分泌研究所)

李寧東,LI Ningdong(天津市眼科醫(yī)院)

趙堪興,ZHAO Kanxing(300070,天津醫(yī)科大學) 

刊 名： 天津醫(yī)藥  ISTIC PKU 英文刊名： TIANJIN MEDICAL JOURNAL  年，卷(期)： 2006 34(7)  分類號： Q3  關鍵詞： 睫狀神經營養(yǎng)因子   基因克隆   真核表達載體   視網膜色素變性   小鼠  

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