用Red/ET重組酶構建基因打靶載體

基因敲除的小鼠模型是研究基因功能的一種重要資源.采用常規(guī)分子克隆的方法建立基因敲除的打靶載體存在構建效率低和難以獲得長片段同源臂的缺點.因此快速高效地構建打靶載體,已成為獲得特定基因敲除動物模型的關鍵環(huán)節(jié).為研究Resp18未知功能分泌肽基因,應用一種新的DNA工程平臺--Red/ET同源重組技術來構建其打靶載體,并比較了這一方法在構建不同長度同源臂中的效率.研究表明,Red/ET重組方法構建打靶載體具有很高的效率,可以獲得較長的同源臂,并且不會引入突變,有助于獲得更高的打靶效率.因此Red/ET重組為構建打靶載體提供了一種新的可靠的方法.

作 者： 楊建嶺 顧淑萍 陳臣 王鑄鋼 許燕 費儉 YANG Jian-Ling GU Shu-Ping CHEN Chen WANG Zhu-Gang XU Yan FEI Jian   作者單位： 楊建嶺,許燕,YANG Jian-Ling,XU Yan(上海師范大學生命與環(huán)境科學學院,上海,200234)

顧淑萍,陳臣,王鑄鋼,費儉,GU Shu-Ping,CHEN Chen,WANG Zhu-Gang,FEI Jian(上海南方模式生物研究中心,上海,201203) 

刊 名： 生物工程學報  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(6)  分類號： Q782  關鍵詞： Red/ET重組   基因打靶   載體  

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