鰻弧菌Vibro anguillarum MVM425sh高效電轉(zhuǎn)化條件的優(yōu)化

目的 建立高效的鰻弧菌電轉(zhuǎn)化系統(tǒng).方法 分別從感受態(tài)細(xì)胞制備的洗滌緩沖液與濃度、復(fù)蘇培養(yǎng)基、二級細(xì)胞收獲時(shí)間、電轉(zhuǎn)化的電壓與脈沖時(shí)間等方面,對鰻弧菌的電轉(zhuǎn)化條件進(jìn)行優(yōu)化.結(jié)果 獲得的鰻弧菌最佳轉(zhuǎn)化條件為二級培養(yǎng)3 h左右收獲細(xì)胞,用272 mmol/L蔗糖洗滌緩沖液制備電轉(zhuǎn)化細(xì)胞,在2.0 kV 3 ms的脈沖條件下,pUC18的轉(zhuǎn)化率達(dá)106個(gè)轉(zhuǎn)化子/μg DNA.結(jié)論 采用優(yōu)化的電轉(zhuǎn)化方法,可獲得較高的轉(zhuǎn)化率,為鰻弧菌中的常規(guī)遺傳操作奠定了良好的基礎(chǔ).

作 者： 吳海珍 張惠展 梁娜 顧振霆 葉江 張?jiān)�興   作者單位： 華東理工大學(xué)生物反應(yīng)器工程國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,上海,200237  刊 名： 中國生物制品學(xué)雜志  ISTIC 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS  年，卷(期)： 2007 20(8)  分類號： Q7  關(guān)鍵詞： 鰻弧菌   電轉(zhuǎn)化   質(zhì)粒   轉(zhuǎn)化率  

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