重組酶Cre基因在大腸桿菌中的高效表達(dá)及其一步純化和活性檢測

為了實現(xiàn)DNA重組酶Cre在體外的應(yīng)用,以pET-30a高效表達(dá)載體為基礎(chǔ)構(gòu)建了pTE30-Cre質(zhì)粒.將此質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌BL21(DE3)中進(jìn)行IPTG誘導(dǎo)的Cre基因的高效表達(dá).對表達(dá)出的Cre重組酶蛋白進(jìn)行鎳離子鰲合法一步純化,并以帶有兩個同向loxP位點的質(zhì)粒為底物,對純化出的Cre酶進(jìn)行活性檢測.該實驗為Cre酶的體外應(yīng)用奠定了基礎(chǔ).

作 者： 王文棋 蓋穎 陸海 蔣湘寧 WANG Wen-qi GAI Ying LU Hai JIANG Xiang-ning   作者單位： 北京林業(yè)大學(xué)生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院  刊 名： 北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF BEIJING FORESTRY UNIVERSITY  年，卷(期)： 2006 28(3)  分類號： Q559+.1  關(guān)鍵詞： DNA重組酶Cre   pET30-Cre高效表達(dá)   一步純化   Cre酶活性檢測  

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