大腸桿菌中高效表達(dá)rhBMP-4的探討及初步活性測定

目的:在大腸桿菌中表達(dá)具有生物活性的rhBMP-BMP-4.方法:在不改變氨基酸序列的前提下,以全基因合成的方式對人BMP-4成熟肽基因全長進(jìn)行定點(diǎn)突變,將之重組入pET-3c表達(dá)載體并轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21(DE)plysS.IPTG誘導(dǎo)和包涵體復(fù)性后,利用C2C12細(xì)胞橫向成骨細(xì)胞分化實(shí)驗(yàn)以及小鼠肌袋異位骨形成實(shí)驗(yàn)檢測其活性.結(jié)果:獲得0.348kb的BMP-4 DNA序列,表達(dá)的目的蛋白主要以包涵體的形式存在.經(jīng)純化及復(fù)性后,體內(nèi)與體外的活性檢測表明rhBMP-4有良好的誘骨生成活性.結(jié)論:該方案能夠?qū)崿F(xiàn)rhBMP-4在大腸桿菌中的高效表達(dá).

作 者： 高思紅 汪炬 董群偉 劉侃 劉雪婷 洪岸 謝秋玲 孫奮勇 GAO Si-hong WANG Ju DONG Que-wei LIU Kan LIU Xue-ting HONG An XIE Qiu-ling SUN Fen-yong   作者單位： 高思紅,汪炬,劉侃,劉雪婷,洪岸,謝秋玲,孫奮勇,GAO Si-hong,WANG Ju,LIU Kan,LIU Xue-ting,HONG An,XIE Qiu-ling,SUN Fen-yong(暨南大學(xué)生物工程研究所,廣州,510632)

董群偉,DONG Que-wei(廣東藥學(xué)院附屬第一醫(yī)院骨科,廣州,510632) 

刊 名： 中國生物工程雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 26(3)  分類號： Q81  關(guān)鍵詞： rhBMP-4   定點(diǎn)突變   包涵   體活性  

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