怎么測定唾液淀粉酶的最適ph

唾液淀粉酶(pancreaticamylase)是由唾液腺分泌的一種水解酶，而淀粉經(jīng)唾液中淀粉酶的水解，生成糊精和麥芽糖。而知道唾液淀粉酶的最適ph對于自身有好處，那么唾液淀粉酶的最適ph是多少呢，又應(yīng)該怎么測定唾液淀粉酶的最適ph？

在底物過量的條件下，相同時間內(nèi)，在溫度、酶濃度相同的條件下，接近最適 pH 的反應(yīng)體系中消耗淀粉的量最大，剩余淀粉與過量碘液生成的顏色越淺，吸光度越小，利用分光光度計測出各管的吸光度后， 取處于升高與降低趨勢之間的較小吸光度范圍對應(yīng)的 pH 值即為唾液淀粉酶的最適 pH。

一、 材料與方法 儀器：吸量管(5mL，1mL) ，試管，試管架，小燒杯， 722 型分光光度計，恒溫箱，吸耳球 試劑：0.01mol/L 碘液，0.2mol/L 磷酸氫二鈉，0.2mol/L 磷酸二氫鈉，淀粉溶液，唾 液，蒸餾水

二、方法：相同時間內(nèi)，在溫度、酶濃度相同、pH 不同的條件下，酶的活度不同，水解的淀粉量不同，剩余的淀粉與過量碘液生成的顏色不同，通過在660nm測量吸光度，得出酶的最適 pH 范圍。

操作步驟：

1、唾液的獲�。赫麴s水漱口后在口中含蒸餾水，適宜時間后將蒸餾水連同唾液一同放置于事先準備好的容器中即可，在實驗過程中應(yīng)注意酶的失活，為了防止此現(xiàn)象發(fā)生應(yīng)將此液體置于冰水中冷卻。

2、不同pH緩沖液配制：根據(jù)下表配置各個pH值的緩沖溶液各10ml

3、淀粉用量的確定(為了更好觀察顏色變化，可以加入適量蒸餾水使總體積相同�；靹�，觀察現(xiàn)象，并選擇顏色變化適中一支，記錄其用量。)

4、酶液稀釋倍數(shù)確定(為了更好觀察顏色變化，可以加入適量蒸餾水使總體積相同，混勻，觀察現(xiàn)象，并選擇適中一支，記錄其稀釋倍數(shù)。)

5、最適pH確定(蒸餾水調(diào)零，測定660nm處吸光度A，最后以A為縱坐標，pH為橫坐標作圖，取曲線最低點對應(yīng)的pH值，即為唾液淀粉酶的最適pH值。)

從上述的實驗中或許可以得出6.8為曲線最低點對應(yīng)的pH值，即為唾液淀粉酶的最適pH值。但是需要注意的是淀粉酶的測定結(jié)果受方法的影響較大，怎么測定唾液淀粉酶的最適ph？不同方法參考值亦有所不同，臨床所用方法也較多，因此必須了解所用測定方法和其參考值，才能作出正確的診斷。

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