DEAE-Sepharose-FF離子交換層析對(duì)牛背最長(zhǎng)肌中鈣激活酶的純化研究

通過DEAE-sepharose-FF離子交換層析法,對(duì)牛背最長(zhǎng)肌中鈣激活酶(calpain)進(jìn)行了分離純化,并確定了最佳分離條件.試驗(yàn)分2個(gè)階段進(jìn)行離子交換線性梯度洗脫,第1階段線性梯度為濃度0～215 mmol/L NaCl,第2階段線性梯度為濃度215～500 mmol/L NaCl,洗脫流速為2 mL/min,并對(duì)每一純化步驟蛋白濃度的變化情況作出了詳細(xì)的描述和說明;在波長(zhǎng)280 nm下測(cè)定洗脫液的光吸收值,洗脫得到3個(gè)蛋白峰,μ-calpain和m-calpain分別在NaCl濃度為130～200 mmol/L和230～330 mmol/L時(shí)被洗脫下來,鈣激活酶蛋白抑制劑(calpastatin)在NaCl濃度為25～125 mmol/L時(shí)被洗脫下來.calpain的分子量約為110 kDa,通過對(duì)提取液電泳試驗(yàn)表明,檢測(cè)結(jié)果恰好在分子量約為110 kDa處有一條清晰的帶,說明所得提取物為calpain.

作 者： 胡鵬 羅欣 杜方嶺 Hu Peng Luo Xin Du Fangling   作者單位： 胡鵬,杜方嶺,Hu Peng,Du Fangling(山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院原子能研究所,山東,濟(jì)南,250100)

羅欣,Luo Xin(山東農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院,山東,泰安,271018) 

刊 名： 農(nóng)產(chǎn)品加工·創(chuàng)新版  英文刊名： AEM RODUCTS ROCESSING  年，卷(期)： 2009 ""(10)  分類號(hào)： Q954.66  關(guān)鍵詞： 鈣激活酶   離子交換色譜   分離純化  

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