pSITITIN載體的構(gòu)建及表達

目的構(gòu)建能阻斷Wistar大鼠肌聯(lián)蛋白表達的siRNA載體,為研究骨髓間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向心肌細胞分化的過程中肌小節(jié)結(jié)構(gòu)蛋白之間的相互關(guān)系打下基礎.方法針對Wistar大鼠TITIN N2B區(qū)設計并構(gòu)建重組質(zhì)粒pSITITIN,針對人β-ACTIN設計并構(gòu)建重組質(zhì)粒pSIACTIN,利用陽離子脂質(zhì)體將其分別轉(zhuǎn)染入體外培養(yǎng)1周的新生大鼠心肌細胞和經(jīng)5-氮雜胞苷(5-azacytidine,5-aza)誘導后2周的MSCs中,免疫熒光檢測肌聯(lián)蛋白的表達.結(jié)果重組質(zhì)粒pSITITIN轉(zhuǎn)染入正常心肌細胞和經(jīng)5-aza處理后的MSCs后,肌聯(lián)蛋白的表達均減弱(P＜0.01);而轉(zhuǎn)染pSIACTIN后不影響肌聯(lián)蛋白的表達.結(jié)論 pSITITIN具有確切阻斷肌聯(lián)蛋白表達的效果.

作 者： 張小飛 陳沅 田杰 ZHANG Xiao-fei CHEN Yuan TIAN Jie   作者單位： 重慶醫(yī)科大學兒童醫(yī)院心血管內(nèi)科,重慶,400014  刊 名： 第三軍醫(yī)大學學報  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE  年，卷(期)： 2006 28(7)  分類號： Q782 R394-33 R394.2  關(guān)鍵詞： 骨髓間充質(zhì)干細胞   RNA干擾   肌聯(lián)蛋白  

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