H5N1亞型禽流感病毒NS1基因在昆蟲細(xì)胞中的表達(dá)

將H5N1亞型禽流感病毒(AIV)NS1基因插入到桿狀病毒轉(zhuǎn)移載體pFastBac1中,獲得重組轉(zhuǎn)移載體pFastBac1-NS1.將pFastBac1-NS1轉(zhuǎn)化到DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞中,篩選到重組轉(zhuǎn)座子rBacmid-NS1.在脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑介導(dǎo)下將rBacmid-NS1轉(zhuǎn)染對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的Sf 9昆蟲細(xì)胞獲得重組桿狀病毒rBV-NS1.rBV-NS1感染Sf 9細(xì)胞后,通過SDS-PAGE、Western blot和ELISA分析表明:獲得了分子量為26kDa的特異性NS1蛋白;并且該蛋白可與H5N1 AIV攻毒鴨的血清發(fā)生特異性免疫反應(yīng),而不能與H5N1AIV滅活疫苗免疫鴨的血清發(fā)生反應(yīng).試驗(yàn)結(jié)果表明:NS1在Sf9昆蟲細(xì)胞中獲得了高效表達(dá),具有與天然蛋白相似的免疫活性,并可以作為區(qū)分免疫及自然感染個(gè)體的鑒別診斷抗原,為建立禽流感病毒自然感染家禽與禽流感滅活疫苗免疫家禽的鑒別診斷方法奠定了基礎(chǔ).

作 者： 劉春國(guó) 劉明 張?jiān)?楊濤 LIU Chun-guo LIU Ming ZHANG Yun YANG Tao   作者單位： 劉春國(guó),劉明,張?jiān)?LIU Chun-guo,LIU Ming,ZHANG Yun(中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院,哈爾濱獸醫(yī)研究所獸醫(yī)生物技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,哈爾濱,150001)

楊濤,YANG Tao(沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué),沈陽,110161) 

刊 名： 中國(guó)生物工程雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 26(6)  分類號(hào)： Q96  關(guān)鍵詞： AIV   H5N1   NS1   桿狀病毒表達(dá)   鑒別抗原  

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