用PCR法檢測蘇云金桿菌的溶原性噬菌體

根據(jù)蘇云金桿菌 (Bacillus thuringiensis, B.t) 溶原性噬菌體GIL01(GenBank Accession Number: AJ536703) 的同源序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物,用35株B.t標(biāo)準(zhǔn)菌株和生產(chǎn)菌株MZ1(血清型H3a3b)的過夜培養(yǎng)物作模板, 結(jié)果有16株菌株包括MZ1能擴(kuò)增出大小約為750 bp的預(yù)期產(chǎn)物,推測這16株菌為溶原菌.MZ1菌株的過夜培養(yǎng)液與指示菌ZK1(血清型H25)混勻并在雙層瓊脂上培養(yǎng)12 h后出現(xiàn)了滴度為2×107 pfu的噬菌斑,從而證明生產(chǎn)菌株MZ1確為溶原菌;又以GIL01同源性較高的其它四個(gè)基因設(shè)計(jì)引物,分別以MZ1的培養(yǎng)物及其溶原性噬菌體基因組為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增,結(jié)果兩者得到幾乎一致的帶型,進(jìn)一步證明了生產(chǎn)菌株MZ1為溶原菌,說明利用PCR法檢測鑒定蘇云金桿菌的溶原性是可行的.比較指示菌方法、直接電鏡法和DNA鑒定法,PCR法快速簡便,對(duì)B.t生產(chǎn)上快速檢測其溶原性噬菌體有實(shí)用意義.

作 者： 廖威 宋少云 陳維春 薛清華 孫釩 艾云燦 龐義 LIAO Wei SONG Shao-yun CHEN Wei-chun XUE Qing-hua SUN Fan AI Yun-can PANG Yi   作者單位： 廖威,LIAO Wei(中山大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院有害生物控制與資源利用國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東,廣州510275;廣西職業(yè)技術(shù)學(xué)院,廣西,南寧,530226)

宋少云,陳維春,薛清華,孫釩,艾云燦,龐義,SONG Shao-yun,CHEN Wei-chun,XUE Qing-hua,SUN Fan,AI Yun-can,PANG Yi(中山大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院有害生物控制與資源利用國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東,廣州,510275) 

刊 名： 中山大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS SUNYATSENI  年，卷(期)： 2006 45(4)  分類號(hào)： Q936 Q939 S476  關(guān)鍵詞： 蘇云金桿菌   溶原性   噬菌體  

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