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醫(yī)學(xué)課題開(kāi)題報(bào)告（通用5篇）
一段忙碌又充實(shí)的大學(xué)生活要即將結(jié)束，大學(xué)生們都接到了要做畢業(yè)設(shè)計(jì)的任務(wù)，在我們做畢業(yè)設(shè)計(jì)之前指導(dǎo)老師都會(huì)要求先寫(xiě)好開(kāi)題報(bào)告，開(kāi)題報(bào)告應(yīng)該怎么寫(xiě)呢？下面是小編為大家收集的醫(yī)學(xué)課題開(kāi)題報(bào)告，希望能夠幫助到大家。
醫(yī)學(xué)課題開(kāi)題報(bào)告 1
一、選題依據(jù)、目的和意義
骨折不愈合是骨科臨床常見(jiàn)病癥，其中以四肢長(zhǎng)骨多發(fā)，例如脛骨，股骨，肱骨等，針對(duì)四肢長(zhǎng)骨骨折不愈合二次手術(shù)我院多才用植骨術(shù)配合LCP重新內(nèi)固定。自體髂骨作為植骨材料具有較多的優(yōu)點(diǎn)：如取材簡(jiǎn)單、組織相容性好、無(wú)移植排斥反應(yīng)、骨誘導(dǎo)作用強(qiáng)等，這些優(yōu)點(diǎn)使得髂骨成為一種最佳的植骨供材，這在臨床上已形成共識(shí)。植骨是治療骨折不愈合的重要方法，其機(jī)制是爬行替代所引起的支架作用與供給礦物質(zhì)的作用，爬行替代順利進(jìn)行的條件要求準(zhǔn)確的復(fù)位、充分的植骨和堅(jiān)強(qiáng)的固定。為達(dá)到充分的植骨，及早促進(jìn)骨折愈合，我們采用髓內(nèi)外36°植骨的方法，外用鋼絲環(huán)扎，配合LCP堅(jiān)強(qiáng)內(nèi)固定，術(shù)后3~1個(gè)月內(nèi)進(jìn)行隨訪，根據(jù)愈合情況和功能恢復(fù)情況分析手術(shù)的臨床療效。選題目地在于探討治療四肢長(zhǎng)骨骨折不愈合的手術(shù)改進(jìn)方法和療效，為臨床治療提供參考。
本課題以導(dǎo)師多年的臨床資料為依據(jù)，通過(guò)對(duì)骨折不愈合手術(shù)治療的國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)進(jìn)行系統(tǒng)整理，結(jié)合山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院骨科病房對(duì)四肢長(zhǎng)骨骨折不愈合患者的隨訪調(diào)查及回顧性分析，根據(jù)骨科特殊生物力學(xué)特點(diǎn)和導(dǎo)師治療骨折不愈合的多年臨床體會(huì)，分析治療效果，并對(duì)手術(shù)中的細(xì)節(jié)問(wèn)題做初步探討與論述。同時(shí)也希望可以通過(guò)對(duì)導(dǎo)師的臨床實(shí)踐的研究、總結(jié)，能為今后的臨床工作提供一些幫助和指導(dǎo)。
二、本課題目前國(guó)內(nèi)外研究的動(dòng)態(tài)、水平
治療骨折不愈合，可分為手術(shù)治療和非手術(shù)治療，其中手術(shù)治療最重要的就是植骨術(shù)加更改斷端內(nèi)固定。骨折不愈合應(yīng)用自體骨移植治療效果顯著，已經(jīng)形成共識(shí)。 植骨是治療骨不連的重要方法，植骨方式臨床多采用髓內(nèi)外聯(lián)合植骨。沿肌間隙進(jìn)入， 骨膜下小心剝離顯露骨折部位， 取出內(nèi)固定器械， 清除骨斷端間瘢痕， 咬除硬化骨， 打通髓腔， 修整骨折端， 手法復(fù)位， 按照骨缺損情況取骨。髓內(nèi)植骨以比髓腔稍粗的骨棒，貼緊髓腔骨質(zhì);髓外上蓋植骨宜用螺絲釘固定植骨塊;骨碎屑充分填充殘余的空隙，這樣才能確實(shí)達(dá)到植骨的目的和要求。自體皮- 松質(zhì)骨植骨的爬行替代縮短了骨折愈合過(guò)程，新鮮的自體骨具有生物活性，不存在免疫排異，無(wú)傳染疾病的風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)存在骨傳導(dǎo)和骨誘導(dǎo)能力。
內(nèi)固定物更換得堅(jiān)持以下原則，原鋼板內(nèi)固定者，可更換成交鎖髓內(nèi)針或更長(zhǎng)的鋼板置于張力側(cè);原交鎖髓內(nèi)針內(nèi)固定者，可選用更大號(hào)髓內(nèi)針或鋼板內(nèi)固定;原先短鋼板內(nèi)固定者，可改成較長(zhǎng)的鋼板。所有病例均需植骨。更換內(nèi)固定物后，術(shù)后石膏外固定者，應(yīng)及早進(jìn)行肌肉收縮鍛煉活動(dòng)，骨痂生長(zhǎng)良好后，去石膏開(kāi)始關(guān)節(jié)屈伸功能鍛煉。但是臨床上醫(yī)師應(yīng)該具體問(wèn)題具體對(duì)待，可以根據(jù)骨痂生長(zhǎng)情況酌情處理，出院時(shí)務(wù)必詳細(xì)醫(yī)囑病人注意事項(xiàng)，配合醫(yī)生，直到骨折完全愈合。LCP鋼板內(nèi)固定適用于四肢長(zhǎng)骨骨折不愈合，可用拉力螺釘固定碎骨塊及移植骨塊， 并對(duì)斷端行軸向加壓鎖定。手術(shù)關(guān)鍵是將骨折端的瘢痕結(jié)締組織全部切除， 骨端硬化骨全部咬除， 露出正常骨質(zhì)， 鉆通髓腔， 植入的骨塊必須牢固的嵌入缺損區(qū)， 間隙用松質(zhì)骨填滿(mǎn)，.應(yīng)積極正確指導(dǎo)術(shù)后功能鍛煉， 嚴(yán)格定期隨訪及指導(dǎo)。避免過(guò)早的不正確的負(fù)重。綜上所述，對(duì)于骨折不愈合的'治療，自體骨移植療效確切，安全穩(wěn)妥，技術(shù)成熟，應(yīng)用廣泛，值得提倡。
三、課題研究的主要內(nèi)容
1臨床資料
11病例來(lái)源
本研究病例均采集于山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院骨科病房
(二)采集時(shí)間
xx年xx月~xx年xx月
(三)病例選擇
1診斷標(biāo)準(zhǔn)
(1)病史：明確的外傷史，骨折后6個(gè)月沒(méi)有愈合，并且沒(méi)有進(jìn)一步愈合傾向已有3個(gè)月。
(2)癥狀：患者骨折端成角、旋轉(zhuǎn)、側(cè)移位、短縮畸形或者節(jié)段性骨缺損、持重疼痛或不能持重、局部在應(yīng)力下疼痛等。
(3)體征：局部竇道形成、流膿、假關(guān)節(jié)形成或伴有局部軟組織瘢痕、缺損等
(4)輔助檢查：X線(xiàn)表現(xiàn)：骨端硬化，髓腔封閉;骨端萎縮疏松，中間存在較大的間隙;或骨端硬化，相互成為杵臼假關(guān)節(jié)等這三種形式中的任何一種就可以定為骨折不愈合。
2 納入病例標(biāo)準(zhǔn)：
(1)符合本病診斷標(biāo)準(zhǔn);
(2)骨折平均愈合時(shí)間超過(guò)半年以上，有假關(guān)節(jié)形成;
(3)骨折平均愈合時(shí)間超過(guò)半年以上，多次復(fù)查X線(xiàn)拍片顯示，骨折線(xiàn)清晰可見(jiàn)，未見(jiàn)內(nèi)外骨痂或內(nèi)外骨痂極少;
(4)拍片顯示骨折線(xiàn)增寬，骨折端骨面致密性硬化，骨髓腔封閉，骨質(zhì)疏松，骨痂間無(wú)骨小梁形成，或伴有明顯的骨缺損;
(5)臨床表現(xiàn)有骨的感染、缺損、畸形、肢體不等長(zhǎng)、局部竇道形成、流膿等。
3排除病例標(biāo)準(zhǔn)：
(1)不符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn)者
(2)患者有嚴(yán)重的內(nèi)科疾病，不能夠耐受手術(shù)者
(3)精神疾病患者
(4)資料不全影響判斷者
4療效觀察方法
對(duì)骨不連愈合的評(píng)價(jià)應(yīng)包括骨愈合和功能恢復(fù)雙重評(píng)價(jià)：
(1)骨愈合評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：本評(píng)價(jià)結(jié)果決定于四項(xiàng)指標(biāo)：骨愈合、感染、畸形和肢體長(zhǎng)度，其中骨愈合標(biāo)準(zhǔn)為X線(xiàn)示骨折線(xiàn)模糊，有連續(xù)骨癡通過(guò)骨折線(xiàn)，拆除或試行松動(dòng)外固定物后骨折無(wú)異�；顒�(dòng)，下肢可無(wú)痛行走，上肢持物骨折處有穩(wěn)定感。 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：
優(yōu)：骨折愈合，無(wú)感染，斷端畸形，雙側(cè)肢體不等長(zhǎng)
良：骨折愈合及其他三標(biāo)準(zhǔn)中兩項(xiàng)。
可：骨折愈合及其他三標(biāo)準(zhǔn)中一項(xiàng)。
差：骨折未愈合或再骨折或雖愈合但不具備其他三標(biāo)準(zhǔn)中任何一個(gè)。
(2)功能評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)
功能的評(píng)價(jià)分上肢與下肢的不同，上肢主要考慮其靈活性，而下肢主要功能為負(fù)重行走。
將下肢評(píng)價(jià)指標(biāo)定為以下五項(xiàng)：①明顯跛行;②踝或膝任何一關(guān)節(jié)僵硬(完全伸膝或踝完全背伸時(shí)，活動(dòng)范圍較正常或?qū)?cè)喪失15°以上)：③軟組織情況不良;④有限制活動(dòng)或影響睡眠的疼痛存在：⑤喪失工作能力或生活不能自理，
優(yōu)：存在工作能力且無(wú)其他四項(xiàng)指標(biāo)。
良：存在工作能力且具以上四指標(biāo)中一至二項(xiàng)。
可：存在工作能力并具以上指標(biāo)中三至四項(xiàng)。
差：?jiǎn)适Чぷ髂芰蛏畈荒茏岳�，不考慮是否具備其他指標(biāo)。
對(duì)上肢功能評(píng)價(jià)參照"Seu和Hdlly對(duì)上肢功能評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)"[3]
觀察指標(biāo)為三項(xiàng)：疼痛、關(guān)節(jié)活動(dòng)范圍、日�；顒�(dòng)能力。
(3)上肢功能評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)
5課題進(jìn)度及安排：
9-5--1-1 收集病例及隨訪
1-1--1-1 資料匯總及數(shù)據(jù)分析
11-1--11-3 撰寫(xiě)論文、定稿
四、本課題特色、預(yù)期取得的結(jié)果
骨折不愈合應(yīng)用自體骨移植治療效果顯著已經(jīng)形成共識(shí)，治療過(guò)程中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)需要不斷的進(jìn)行，更要求開(kāi)展回顧性工作及進(jìn)行系統(tǒng)的整理。因此，骨折不愈合的臨床資料分析就顯得尤為重要。
本課題通過(guò)搜集整理山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院骨科9至1年期間的患者臨床資料，對(duì)于自體骨移植治療骨折不愈合的相關(guān)性問(wèn)題進(jìn)行臨床研究與總結(jié)。應(yīng)用統(tǒng)計(jì)分析評(píng)分進(jìn)行術(shù)前、術(shù)后及相關(guān)方面比較，對(duì)自體骨移植治療骨折不愈合的臨床療效獲得客觀、真實(shí)、準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)，并進(jìn)一步指導(dǎo)臨床工作。
五、可行性分析
山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院骨科是山東省中醫(yī)管理局評(píng)定的重點(diǎn)學(xué)科、重點(diǎn)科室，在省內(nèi)知名度較高，病人來(lái)源廣泛。導(dǎo)師王明喜主任醫(yī)師從事臨床工作3余年，具有豐富的臨床經(jīng)驗(yàn)，對(duì)治療骨折不愈合做過(guò)大量研究、臨床工作，并取得了良好的效果。本課題搜集整理山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院骨科近幾年的臨床資料，并在導(dǎo)師指導(dǎo)下對(duì)這些一手資料進(jìn)行研究與總結(jié)。
四肢長(zhǎng)骨骨折不愈合由于并發(fā)癥較多，治愈比較困難，手術(shù)后功能恢復(fù)過(guò)程漫長(zhǎng)，因此在治療過(guò)程中，經(jīng)驗(yàn)的總結(jié)是非常必需的，也是可行的。本課題主要研究山東省中醫(yī)院近年應(yīng)用鋼絲環(huán)扎36°植骨配合LCP內(nèi)固定治療四肢長(zhǎng)骨骨折不愈合的治療效果分析情況，因此在選題上可行性較強(qiáng)。課題的研究也得到了學(xué)校、附院等各部門(mén)、科室的大力支持。相信可以圓滿(mǎn)地完成課題。
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醫(yī)學(xué)課題開(kāi)題報(bào)告 2
研究生姓名：xx
導(dǎo)師姓名、職稱(chēng)：xxx
學(xué)科專(zhuān)業(yè)：基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院
研究方向：方劑的配伍規(guī)律及臨床運(yùn)用
一 研究目的與意義
1.研究目的
百合病最早見(jiàn)于張仲景的《金匱要略》，屬中醫(yī)情志病范疇�！督饏T﹒百合狐惑陰屬陽(yáng)毒病證治》篇將“百合病”描述為：“意欲食復(fù)不能食，常默然，欲臥不能臥，欲行不行，飲食或有美時(shí)，或有不用聞食臭時(shí)，如寒無(wú)寒，如熱無(wú)熱，口苦，小便赤，諸藥不能治，得藥則劇吐利，如有神靈者，身形如和，其脈微數(shù)�！睆陌俸喜〉呐R床表現(xiàn)看，與抑郁癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)有較多的相似之處。所以現(xiàn)代不少醫(yī)家都將中醫(yī)的百合病歸屬于抑郁癥[1,2,3]。百合知母湯為治療百合病的經(jīng)典方藥之一，由百合和知母兩味藥組成。百合寧心安神，潤(rùn)肺止咳;知母清熱瀉火，滋陰潤(rùn)燥。百合甘寒清潤(rùn)而不膩，知母苦寒降火而不燥。百合偏于補(bǔ)，知母偏于瀉。二藥伍用，一潤(rùn)一清，一補(bǔ)一瀉，共奏潤(rùn)肺清熱，寧心安神之效。主治陰虛或溫?zé)岵『笥酂崮┣�，以致頭昏、心煩不安、失眠等癥以及情志不遂，以致精神恍惚、不能自制等癥。 故本課題旨在通過(guò)體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)揭示百合知母湯抗抑郁可能的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制。
2.研究意義
抑郁癥是常見(jiàn)的危害人類(lèi)身心健康一類(lèi)精神疾病，以顯著而持久的情感或心境低落為主要特征，在WHO的一項(xiàng)流行病學(xué)調(diào)査中發(fā)現(xiàn)全世界約有10%-20%的人一生中曾有過(guò)抑郁體驗(yàn)[4]。隨著現(xiàn)代社會(huì)的生活壓力逐漸增高、工作節(jié)奏加快，人們處于應(yīng)激狀態(tài)中的機(jī)會(huì)增多，抑郁癥的發(fā)病率更逐年上升[5,6]，越來(lái)越多的患者正遭受抑郁癥的折磨，給家庭及社會(huì)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。因此，加強(qiáng)抑郁癥的防治，尋找安全、有效的治療方法，具有非常重要的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)意義。
抑郁癥發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，誘因繁多，針對(duì)某一單一環(huán)節(jié)的藥物難以取得滿(mǎn)意的療效，許多抗抑郁西藥存在抗抑郁譜窄、起效慢、藥價(jià)高、依從性差、副作用大及易復(fù)發(fā)等不足[7]。傳統(tǒng)的中醫(yī)學(xué)中蘊(yùn)含著豐富的心身醫(yī)學(xué)思想，其“形神合一論”，“天人合一論”就包含了廣義的心身醫(yī)學(xué)思想。因此國(guó)內(nèi)外越來(lái)越重視傳統(tǒng)中草藥及復(fù)方抗抑郁的研究，開(kāi)展了廣泛而深入的實(shí)驗(yàn)研究，積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)，且實(shí)驗(yàn)研究成果在臨床運(yùn)用中也取得了良好的療效，為中醫(yī)學(xué)和現(xiàn)代心身醫(yī)學(xué)的融合、發(fā)展提供了新的契機(jī)。中醫(yī)心身醫(yī)學(xué)研究工作逐漸起步，心身醫(yī)學(xué)的中醫(yī)藥防治研究工作在病因病機(jī)及臨床診斷方面也取得一定的進(jìn)展[8]。
隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，抗抑郁藥物抗抑郁作用機(jī)制已由細(xì)胞外單胺遞質(zhì)途徑，逐步轉(zhuǎn)向細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制，而目前針對(duì)百合知母湯抗抑郁作用機(jī)制的研究大都局限在行為學(xué)觀測(cè)、腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)內(nèi)分泌等方面。本研究采用大鼠慢性應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)抑郁模型，對(duì)百合知母湯的抗抑郁作用及其細(xì)胞內(nèi)作用機(jī)制進(jìn)行研究，以期為其進(jìn)一步的新藥開(kāi)發(fā)研究和臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
二 研究現(xiàn)狀
1.百合病的研究現(xiàn)狀
1.1百合病的起源
百合病始見(jiàn)于張仲景《金匱要略·百合狐惑陰陽(yáng)毒病證治第三》篇：百合病者，百脈一宗，悉致其病也。意欲食復(fù)不能食，常默然，欲臥不能臥，欲行不能行，飲食或有美時(shí)，或有不用聞食臭時(shí)，如寒無(wú)寒，如熱無(wú)熱，口苦，小便赤，諸藥不能治，得藥則劇吐利，如有神靈者，身形如和，其脈微數(shù)。這段文字概括了百合病的主要癥狀是精神、飲食、睡眠、行為、語(yǔ)言、感覺(jué)的失調(diào)，與西醫(yī)學(xué)抑郁癥的主要癥狀有頗多相似之處。“百脈一宗者，分之則為百脈，合之則為一宗”因人體百脈同出一源，源病則百脈合病，周身受累，因此而得名百合病。
1.2百合病的病因病機(jī) 百合病的病因病機(jī)為傷寒熱病之后，余熱傷陰，或情志不遂，郁熱傷陰，導(dǎo)致心肺陰虛內(nèi)熱，百脈失養(yǎng)而成。病機(jī)特點(diǎn)是心肺陰虛內(nèi)熱，心神失養(yǎng)，以神志改變?yōu)橹饕R床特點(diǎn)。心肺陰虛，余邪未盡，則出現(xiàn)口苦、小便赤、脈微數(shù)。該組癥狀是百合病的主要客觀體征。百脈遍布周身，百脈失和，則行動(dòng)感覺(jué)變異，如“欲臥不能臥，欲行不能行”“意欲食復(fù)不能食，飲食或有美時(shí)，或有不用聞食嗅時(shí)”“如寒無(wú)寒，如熱無(wú)熱”等。神志失和，則現(xiàn)“如有神靈者”“常默默”。
1.3百合病的治療法則
百合病以心肺陰虛為基本病機(jī)，以滋養(yǎng)心肺、潤(rùn)燥安神為治療法則。可“隨證治之”分為以下幾型：①正治法：“百合病，不經(jīng)吐、下、發(fā)汗，病形如初者，百合地黃湯主之�！卑俸喜∥唇�(jīng)誤治，日雖久而病形如初者，以滋養(yǎng)心肺陰血，清熱安神為法，以百合地黃湯主之。取百合潤(rùn)養(yǎng)心肺，清氣分虛熱，生地滋養(yǎng)心血，清血分虛熱，泉水煎藥，取清熱助陰，血熱從小便下行之功。諸藥合用，心肺得養(yǎng)，氣血同治，陰復(fù)熱清，百脈和調(diào)，病癥自除。②誤汗后：“百合病發(fā)汗后者，百合知母湯主之。” 百合病誤用汗法，汗后陰液受傷，心肺陰虛加重，燥熱尤甚，除具備百合病的基本癥狀外，尚可出現(xiàn)津傷燥熱的心煩、少寐、口干或渴、午后潮熱、小便短少等癥候。治宜養(yǎng)陰清熱、潤(rùn)澡除煩，用百合知母湯主治。③誤下后的滑石代赭湯(百合、滑石、代赭石)。④誤吐后的百合雞子湯(百合、雞子黃)。⑤久病變渴的外用百合洗方(百合)。如內(nèi)服外洗仍口渴不解，方用栝蔞牡蠣散(栝蔞根、牡蠣)。⑥久病變發(fā)熱的百合滑石散(百合、滑石)。
2.抑郁癥的研究現(xiàn)狀
2.1抑郁癥的起源
抑郁癥是一種情感性精神障礙，臨床上以情緒低落、思維遲緩和精神運(yùn)動(dòng)性抑制為特征，其它癥狀包括喪失自尊、不恰當(dāng)?shù)膬?nèi)疚感、死亡和自殺念頭、注意力集中程度降低以及睡眠和食欲減退，還可能伴有各種軀體癥狀。
抑郁癥是一種最普通的精神疾病。我國(guó)對(duì)情感性精神障礙進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查1985年：終生患病率約為12%。我國(guó)對(duì)抑郁癥的識(shí)別率低,臨床漏診率達(dá)50-60%。一般內(nèi)科醫(yī)生對(duì)包括抑郁癥在內(nèi)的心理障礙的識(shí)別率只有15.9%,約只有1/4的抑郁癥病人才能接受正規(guī)治療。有專(zhuān)家認(rèn)為我國(guó)抑郁癥的發(fā)病率應(yīng)為10-15%，隨著人口的逐步老齡化，抑郁癥在60歲以上人群中的發(fā)病率將高達(dá) 20%～50%。1994年WHO全球調(diào)查發(fā)現(xiàn),抑郁癥的現(xiàn)癥患病率現(xiàn)癥患病率為11.4%,終生患病率為20-30%。約13 - 20%的人一生中曾有過(guò)至少一次抑郁體驗(yàn)。《20xx 年世界衛(wèi)生報(bào)告》指出，抑郁癥目前已成為世界第四大疾患，到 20xx 年抑郁癥可能成為僅次于心臟病的第二大疾病，抑郁癥正在成為一個(gè)嚴(yán)重的全球問(wèn)題[9-13]。
2.2抑郁癥的發(fā)病
抑郁癥的病因十分復(fù)雜，一般認(rèn)為病因可能與遺傳、人格特征、心因因素有關(guān)。其發(fā)病機(jī)制也處于假說(shuō)階段，主要包括單胺遞質(zhì)學(xué)說(shuō)、神經(jīng)內(nèi)分泌學(xué)說(shuō)、信號(hào)通路學(xué)說(shuō)[14-15]。
單胺假說(shuō)作為抑郁癥研究的重點(diǎn)認(rèn)為單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)(如5-輕色胺、多巴胺、去甲腎上腺素等)的失衡可導(dǎo)致抑郁的發(fā)生。大量研究亦顯示抑郁癥與遺傳、神經(jīng)、心理等因素誘發(fā)的中樞5-羥色胺(5-HT)、去甲腎上腺(Norepinephrine,NE)、多巴胺(Dopamine, DA)等單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)含量降低及其受體功能下降有關(guān) [16-17]。有研究[18]表明抑郁模型大鼠下丘腦、紋狀體、海馬內(nèi) 5-HT、NE及DA 及其代謝產(chǎn)物、合成前體的含量明顯降低。這也支持了經(jīng)典的單胺遞質(zhì)學(xué)說(shuō)。①5-HT：抑郁癥的發(fā)病機(jī)制涉及突觸間隙5-HT水平及5-HT受體亞型功能的失調(diào)。5-HT功能活動(dòng)降低,則患者心情抑郁、食欲減退、運(yùn)動(dòng)活動(dòng)減少。Coppent[19]等于1965年首先提出5-HT與抑郁癥有關(guān),認(rèn)為抑郁癥是由中樞神經(jīng)系統(tǒng)5-HT釋放減少,突觸間隙的含量下降而引起的。近年來(lái),研究發(fā)現(xiàn)了很多5-經(jīng)色胺的受體亞型,使得5-HT遞質(zhì)系統(tǒng)與抑都癥發(fā)病的關(guān)系越來(lái)越受到關(guān)注。②NE：大量研究證明腦內(nèi)N E的絕對(duì)或相對(duì)缺乏會(huì)引起情緒低落、心境抑郁。Schildkraut[20]于1965年首先提出抑郁癥的發(fā)生是由于腦中NE不足所致,中樞神經(jīng)系統(tǒng)中NE含量不足則發(fā)生抑郁癥NE的缺乏可能是由于內(nèi)源性的生成釋放異�；蛴捎贜E系統(tǒng)慢性刺激所致的繼發(fā)性粍竭[21]。Bmnello[22]等指出,自從發(fā)現(xiàn)一些藥物通過(guò)改變NE代謝既能導(dǎo)致抑郁癥又能緩解抑郁癥,NE在抑郁癥中所起的作用越來(lái)越受到關(guān)注。③DA：1975年Randrup首先提出,抑郁癥的發(fā)病可能與DA有關(guān)。后來(lái)Maj等研究者證實(shí),幾乎所有長(zhǎng)期抗抑郁治療的患者都會(huì)增加D A誘導(dǎo)的獎(jiǎng)賞反應(yīng)。1983年Willner等提出抑郁癥存在DA功能的降低,尤其是伴隨有精神運(yùn)動(dòng)遲滯的患者[23]。對(duì)抑郁癥自殺者尸檢結(jié)果提示,抑郁癥自殺患者尾狀核和伏核的DA代謝率降低[24]。
目前,抑郁癥的神經(jīng)內(nèi)分泌機(jī)制研究中,下丘腦一垂體一腎上腺軸(HPA軸)功能亢進(jìn)是較為公認(rèn)的`發(fā)病機(jī)制之一。大量研究顯示,抑郁癥患者的HPA軸功能 亢進(jìn),血漿促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素CHR、促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)和皮質(zhì) 醇(CORT)濃度明顯升高,而且這種功能亢進(jìn)是依賴(lài)性的,隨著抑郁的恢復(fù),HPA軸的功能也逐步恢復(fù)正常[25]。Catalan[26]等發(fā)現(xiàn)抑郁癥患者下丘腦及下丘腦外的促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)濃度都升高,重度抑郁組比輕度與中度抑郁發(fā)作CRF血濃度更高,且CRF與皮質(zhì)醇血濃度顯著相關(guān)。 在發(fā)病機(jī)制方面，受體后信號(hào)通路及其第二信使系統(tǒng)在該病發(fā)病及治療中的作用是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。以腦內(nèi)cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(cAMP response element binding protein ,CREB )為交匯點(diǎn)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路正受到越來(lái)越多的關(guān)注，尤其是海馬CREB的改變。早在1996 年，Nibuya[27]等就報(bào)道抗抑郁治療，大鼠海馬 CA1 區(qū)、CA3 區(qū)和齒狀回均可見(jiàn)CREB mRNA的表達(dá)增多。CREB 可能是各種抗抑郁信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的交匯點(diǎn)。海馬CREB的表達(dá)和活化受到多種信號(hào)分子和信號(hào)通路的影響：
�、傧佘账岘h(huán)化酶/環(huán)磷酸腺苷/蛋白激酶A通路(AC/cAMP/PKA通路)，是研究最早的抗抑郁通路。其主要過(guò)程是：胞外信號(hào)激活胞膜上G蛋白耦聯(lián)受體→AC激活→胞內(nèi)cAMP升高(降解cAMP的酶主要是磷酸二酯酶)→PKA激活→CREB磷酸化→調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄→生物學(xué)效應(yīng)。Li和Branski[28,29]等實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)海馬cAMP通路的激活對(duì)改善抑郁癥狀起積極作用。
�、诶野彼峒っ甘荏wB/絲裂原活化蛋白激酶/核糖體 S6激酶通路(TrKB/MAPK/RSK通路)，是一條和細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、凋亡以及突觸可塑性密切相關(guān)的信號(hào)通路。在各種 MAPK 通路中，細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2 (ERK1/2)信號(hào)通路與抑郁癥關(guān)系最為密切。ERK1/2 通路激活的大致過(guò)程是：TrKB 的激活→MAPK激酶激酶(MAPKKK, RAF)的激活→MAPK激酶(MAPKK, MEK)的激活→ERK1/2的激活→RSK的激活→ CREB 磷酸化→調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄→生物學(xué)效應(yīng)。抑郁癥患者的尸檢報(bào)告顯示腦內(nèi)MAPK減少可能是嚴(yán)重抑郁癥的病因之一[30]。
�、跜a2+/鈣調(diào)蛋白/鈣調(diào)蛋白依賴(lài)的蛋白激酶通路(Ca2+/CaM/CaMK通路)，通路涉及多種離子通道、受體和酶，其激活的主要過(guò)程是：胞漿內(nèi)鈣濃度升高→鈣離子與CaM結(jié)合→激活CaMK→CREB磷酸化→調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄→生物效應(yīng)。王慶松等 [31]利用貓對(duì)大鼠造成急性捕食應(yīng)激，發(fā)現(xiàn)在捕食應(yīng)激后大鼠海馬細(xì)胞內(nèi) CaM 信 號(hào)通路調(diào)控紊亂，表現(xiàn)在細(xì)胞內(nèi) Ca2+濃度明顯升高，Ca2+-CaM 復(fù)合體增多，CaMK的表達(dá)升高，提示海馬該信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在嚴(yán)重心理應(yīng)激所致的行為異常中可能有重要意義。
3.百合知母湯的研究現(xiàn)狀
3.1百合的研究現(xiàn)狀
方中百合為百合科植物百合Lilium brownii F. E. Brown var. colchesteri Wils.、卷丹 Lilium lancifolium Thunb.和細(xì)葉百合 Lilium pumilum DC.的肉質(zhì)鱗莖。味甘，性微寒。入心、肺經(jīng)。本品氣味稍緩，甘中有收，既能清心肺之余熱，而斂氣養(yǎng)心、安神定魄，用于治療熱性病后、余熱末盡所引起的神思恍惚、煩躁失眠、莫名所苦的“百合病”，又能潤(rùn)肺止咳，用于治療肺燥咳嗽，或肺虛久咳，或陰虛久咳、痰中帶血等癥。 百合中主要含有酚酸甘油酯、苷類(lèi)、生物堿及多糖，另外還含有一些磷脂、蛋白質(zhì)和無(wú)機(jī)元素。藥理研究表明百合具有抗癌、止咳、耐缺氧與抗疲勞、提高機(jī)體細(xì)胞免疫功能等作用[32-34]。
3.2知母的研究現(xiàn)狀
方中知母為百合科植物知母 Anemarrhena asphodeloides Bge.的根莖。味苦、甘，性寒。入肺、胃、腎經(jīng)。本品質(zhì)潤(rùn)，苦寒不燥、，沉中有浮，降中有升。上行能清肅肺氣，以瀉肺火，潤(rùn)肺燥、除煩熱、止咳嗽，用于治療溫?zé)岵�，邪在氣分，癥見(jiàn)高熱、煩躁、口渴、脈洪大者，以及陰虛燥咳，或肺熱咳嗽諸癥;入于中，善清胃火、除煩渴，用于治療消渴病之中消諸癥;行于下，則能瀉相火、滋腎燥，用于治療陰虛火旺、骨蒸潮熱、盜汗等癥。
知母主要含有皂苷、黃酮、雙苯吡酮、木脂素等成分�，F(xiàn)代研究表明，知母具有抗病原微生物、抗血小板聚集、降血糖、解熱、抗炎、降低轉(zhuǎn)氨酶等多種藥理活性[35-37]。
3.3 百合知母湯的研究現(xiàn)狀
百合知母湯有養(yǎng)陰清熱、除煩潤(rùn)燥之效，以潤(rùn)養(yǎng)心肺為大法，治療百合病誤汗后，津液受傷，虛熱較甚者。臨床上運(yùn)用百合知母湯治療乳腺增生病[38-39]、長(zhǎng)期低熱[40]、消渴、喘證、盜汗、胃脘痛[41]、失眠[42]、抑郁[43]等癥。
三 研究思路與立題依據(jù)
1.研究思路 百合知母湯是《金匱要略》中治療百合病的經(jīng)典方劑。百合病的描述“百合病者，百脈一宗，悉致其病也，欲臥不能臥，欲行不能行……意欲食復(fù)不能食，常默默，如有神靈者……”主要?dú)w納為情緒障礙、軀體不適，與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)抑郁癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)有很大的相似性，因此一般將百合病歸屬于抑郁癥范疇。百合知母湯中的部分有效成分能通過(guò)提高抑郁癥大鼠大腦皮層單胺遞質(zhì)、抑制HPA軸亢進(jìn)、提高模型動(dòng)物腦組織BDNF含量等途徑發(fā)揮抗抑郁效應(yīng)。
CREB 可能是各種抗抑郁信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的交匯點(diǎn)。抗抑郁藥物(包括中藥)或其它治療措施可通過(guò)調(diào)節(jié)一種或幾種通路，最終激活CREB，調(diào)節(jié) BDNF 等基因表達(dá)，影響神經(jīng)元增殖、分化、成熟等可塑性改變，發(fā)揮抗抑郁作用。參與調(diào)節(jié)CREB的各調(diào)節(jié)因子之間、通路之間存在復(fù)雜的交叉聯(lián)系和相互作用，共同維持著CREB活性的平衡。近年來(lái)研究提示：抑郁模型小鼠，存在神經(jīng)元蛋白和營(yíng)養(yǎng)因子在海馬的表達(dá)異常，而這些變化可以被一些中藥逆轉(zhuǎn)[44]。當(dāng)前致力于闡明信號(hào)通路、CREB、營(yíng)養(yǎng)因子、神經(jīng)再生之間是如何相互聯(lián)系的，以及細(xì)胞靶點(diǎn)、分子應(yīng)答、行為反應(yīng)的調(diào)節(jié)與抗抑郁之間錯(cuò)綜復(fù)雜的關(guān)系。這將有助于我們以CREB為中心了解抑郁癥的病理生理機(jī)制，并在此基礎(chǔ)上研發(fā)出療效可靠、起效迅速、副作用小、經(jīng)濟(jì)實(shí)用的新藥，尤其是幫助我們更好地認(rèn)識(shí)一些中藥抗抑郁的可能機(jī)制，更充分地利用祖國(guó)寶貴的中醫(yī)藥資源。
細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是目前抗抑郁機(jī)制研究的重點(diǎn)和熱點(diǎn)�？杀欢喾N不同的信號(hào)路徑激活。環(huán)磷酸腺苷(cAMP)、絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)、鈣調(diào)蛋白激酶(CaMK)等3條通路是目前認(rèn)為與抗抑郁相關(guān)、最主要的信號(hào)通路，這3個(gè)主要上游通路最終都使CREB磷酸化，進(jìn)而調(diào)節(jié)其下游通路的基因表達(dá)，完成神經(jīng)元生化功能，而CREB是上述3種通路的交匯點(diǎn)。
前期的研究證實(shí)：百合知母湯抗抑郁的機(jī)制與提高慢性不可預(yù)見(jiàn)性應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)抑郁(CUMS)模型大鼠海馬組織5-HT含量、提高腦組織中CREB(cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白)mRNA的表達(dá)有關(guān)(見(jiàn)7.3)。有鑒于此，我們提出假設(shè)：百合知母湯抗抑郁的信號(hào)機(jī)制可能與以上三種細(xì)胞內(nèi)通路有關(guān)，三個(gè)通路在抗抑郁機(jī)制中可能會(huì)有所偏重。
圍繞假設(shè)，基于CREB磷酸化通路，本課題擬將百合知母湯作用于CUMS大鼠，運(yùn)用ELISA、RT-PCR、免疫組化、Western 印記等方法，檢測(cè)大腦組織cAMP信號(hào)中cAMP和PKA、MAPK信號(hào)中TrKB和BDNF、CaMK信號(hào)中鈣調(diào)蛋白(CaM)和CaMK等關(guān)鍵因子，初步探討百合知母湯抗抑郁的信號(hào)機(jī)制,篩選出該方抗抑郁的基因靶點(diǎn)。
2.立題依據(jù)
中藥復(fù)方具有成分多、作用環(huán)節(jié)多、靶點(diǎn)多的特點(diǎn)，多環(huán)節(jié)之間具有協(xié)同效應(yīng)。因此研究中藥及其方劑的抗抑郁作用具有極大的挖掘潛力，而且對(duì)解決日益增加的抑郁患者的痛苦有重大的社會(huì)意義[45-46]。
四 研究?jī)?nèi)容及目標(biāo)
1.建立慢性不可預(yù)見(jiàn)性應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)大鼠抑郁(CUMS)模型;
2.通過(guò)檢測(cè)用藥前后模型動(dòng)物大鼠海馬組織環(huán)磷酸腺苷(cAMP)和蛋白激酶A(PKA)含量變化，評(píng)價(jià)百合知母湯對(duì)抑郁癥cAMP信號(hào)的干預(yù)作用;
3.通過(guò)檢測(cè)用藥前后模型動(dòng)物大鼠絡(luò)氨酸激酶受體B(TrKB)和腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)含量變化，評(píng)價(jià)百合知母湯對(duì)抑郁癥MAPK信號(hào)的干預(yù)作用;
4.通過(guò)檢測(cè)用藥前后模型動(dòng)物大鼠海馬組織中鈣調(diào)蛋白(CaM)和鈣調(diào)蛋白激酶(CaMK)含量變化，評(píng)價(jià)百合知母湯對(duì)抑郁癥CaMK信號(hào)的干預(yù)作用;
五 擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題
通過(guò)檢測(cè)cAMP、MAPK、CaMK三條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)路徑上重要調(diào)節(jié)因子cAMP、PKA、TrKB、BDNF、CaM、CaMK用藥前后的變化，初步評(píng)估百合知母湯對(duì)以上三個(gè)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)路徑的干預(yù)作用，評(píng)價(jià)方劑抗抑郁的機(jī)制，以便進(jìn)一步篩選出方劑抗抑郁靶點(diǎn)。
六 實(shí)驗(yàn)研究方案
1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SD雄性大鼠，7—12周齡，體重180—200g 2.藥物制備
按照《金匱要略》中記載的方法：百合七枚(劈)(約20g)，知母三兩(切)(約10g)即百合：知母=2:1。取百合100g，知母50g，先以清水將百合浸泡12小時(shí)，當(dāng)白沫出，去其水，再加清水20xxml，武火煎開(kāi)后改為文火，得百合煎煮液1000ml;再用清水20xxml，先武火后文火，得知母煎煮液1000ml;將2次煎煮液混合，文火濃縮得煎煮液1500ml。按照比例配制足夠數(shù)量百合知母湯煎煮液，放入冰箱-20℃儲(chǔ)存?zhèn)溆谩ＥR用時(shí)取出，濃縮至合適體積。為確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可比性，所有實(shí)驗(yàn)都用同一批藥材。所有藥物的給藥劑量根據(jù)“人和動(dòng)物體表面積折算的等效劑量比率表”計(jì)算而來(lái)：大鼠(200g)用藥量=人(70kg)日用劑量*0.018。每只大鼠的給藥體積為1ml/100g。
百合知母湯終濃度為2.2g/Kg/d(成人日用量30g)
氟西汀終濃度為1.8mg/kg/d(成人日用量20mg)
各組按濃度給藥28天，對(duì)照組給等體積的三蒸水。
3.CUMS抑郁癥模型大鼠制備
除正常對(duì)照組外，其余動(dòng)物采用慢性輕度不可預(yù)見(jiàn)性溫和刺激結(jié)合孤養(yǎng)(CUMS)的造模方法：各造模組大鼠均單籠飼養(yǎng)，刺激因子包括禁食、禁水、4℃冰水游泳、夾尾、晃尾、潮濕墊料和傾斜45°、束縛應(yīng)激、陌生物品、空籠刺激、噪音刺激、閃光刺激、水平震蕩、晝夜顛倒等。每日隨機(jī)給予2到3種刺激，使大鼠不能預(yù)料刺激的發(fā)生以避免產(chǎn)生適應(yīng)。每種刺激交叉累計(jì)使用2-3次，持續(xù)21天，造模成功后，給藥期間繼續(xù)維持造模。建立慢性溫和不可預(yù)見(jiàn)性應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)(CUMS)抑郁癥大鼠模型,具體操作方法如下：
(1)禁水：即24小時(shí)不予供水。具體方法為,造模當(dāng)天,上午8:00始,撤出大鼠籠內(nèi)供水瓶,禁水24小時(shí)后,于次日上午8:00正常供水。
(2)禁食：即24小時(shí)禁止進(jìn)食。具體方法為,造模當(dāng)天上午8:00始,清除鼠籠內(nèi)所有鼠糧,剝奪進(jìn)食24小時(shí)后,禁食期間供水正常。禁食后給少量碎食,然后正常詞養(yǎng).
(3)晝夜顛倒：造模當(dāng)天,上午8:00,將正常對(duì)照組大鼠轉(zhuǎn)移至其它SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)室后,關(guān)閉本實(shí)驗(yàn)室所有電源,模仿黑夜,至20:00準(zhǔn)時(shí)打開(kāi)實(shí)驗(yàn)室電源,模仿白晝,給大鼠制造晝夜顛倒的假象。
(4)夾尾：用纏裹有膠布的塑料夾,夾持鼠尾根部,時(shí)長(zhǎng)為5min。
(5)晃尾：提住大鼠尾巴中部以每秒鐘1次的頻率,晃尾15分鐘,晃尾時(shí)力度要輕柔,避免牽拉大鼠尾尖部位,以防脫皮
(6)冰水游泳：取一直徑為30cm玻璃缸,注入適量清水后加入適量冰塊,調(diào)整水溫至4℃(根據(jù)天氣情況,適當(dāng)調(diào)整,以防凍傷),同時(shí)調(diào)整水液平面據(jù)器皿邊緣約15-20cm,然后將大鼠放入冰水中,強(qiáng)迫其游泳5min。5min后將大鼠榜出,先用干毛巾擦拭動(dòng)物毛發(fā),然后用吹風(fēng)機(jī)吹干,避免感冒。每次冰水游泳結(jié)束后需撈干凈游泳器皿內(nèi)大鼠類(lèi)便,避免對(duì)下一只鼠產(chǎn)生影響。
(7)高速水平震蕩：將動(dòng)物放入空的鼠籠中，進(jìn)行人工振蕩，2 次/秒，有效節(jié)奏連續(xù)持續(xù) 5min;或者水平晃動(dòng)，1次/秒，持續(xù)30分鐘
(8)噪音刺激：90分貝噪音刺激2h，盡量選在白天大鼠休息的時(shí)候給予此種刺激。
(9)束縛刺激：將大鼠束縛于500ml燒杯中2h，注意保持通氣。
(10)潮濕環(huán)境：將大鼠的墊料換以潮濕墊料，持續(xù)刺激12h。
(11)異物刺激：往大鼠籠內(nèi)放置金屬條棒，鈍性玻璃器皿的異物予以刺激，持續(xù)2h。
(12)空 籠：撤掉大鼠籠里面的墊料籠子里不放置任何物品，持續(xù)12h。
(13)傾斜刺激,：該刺激因素通常在禁水后進(jìn)行,應(yīng)激動(dòng)物本身饑渴,在傾斜的鼠籠中覓食覓水更為困難。
(14)閃光刺激：LED頻閃燈，頻閃頻率2次/s，持續(xù)刺激2h。
以上各種刺激的實(shí)施順序遵循由弱(輕刺激,如晝夜顛倒、禁水禁食、潮濕環(huán)境)到強(qiáng)(重刺激,如冰水游泳,夾尾，晃尾，束縛刺激，噪音，閃光等刺激)的原則,以避免刺激之間的交互作用。每日采用1種刺激,平均每種刺激被采用2—3次,同種刺激不能連續(xù)出現(xiàn),使動(dòng)物不能預(yù)料刺激的發(fā)生。
4.行為學(xué)指標(biāo)的測(cè)量
主要包括 1%蔗糖水消耗率、體重變化率、敞箱實(shí)驗(yàn)、Morris 水迷宮實(shí)驗(yàn)
4.1體重變化率
分別在實(shí)驗(yàn)的第 1d、15d、22d、29、36d 、43d、50d、57、64d進(jìn)行。動(dòng)物體重變化率(%)=(當(dāng)日測(cè)量的體重-第1天的體重)/第1天的體重。 4.2糖水消耗實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)前期準(zhǔn)備，在安靜的環(huán)境內(nèi)訓(xùn)練動(dòng)物適應(yīng)含糖飲水：第一個(gè)24h，每籠同時(shí)放置兩個(gè)完全相同的動(dòng)物水瓶，兩瓶均為同等重量的1%蔗糖水;第二個(gè)24 h， 一瓶為1%鹿糖水,一瓶為相同重量的純凈水。然后進(jìn)入實(shí)驗(yàn)階段，禁水禁食24h后,測(cè)定9p.m-7a.m 10小時(shí)內(nèi)大鼠1%蔗糖水?dāng)z入量。糖水偏愛(ài)率% =糖水消耗量/(糖水消耗量+清水消耗量)X100%。適養(yǎng)期間進(jìn)行三次糖水偏愛(ài)篩選,將糖水偏愛(ài)率異常的大鼠剔除,不用于正式實(shí)驗(yàn)(三次糖水偏愛(ài)測(cè)試中均只喝自來(lái)水的大鼠為異常大鼠)。測(cè)定動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)第1天、第22天、第49天、第64天糖水偏愛(ài)率的變化。
4.3 敞箱實(shí)驗(yàn)
敞箱實(shí)驗(yàn)(Open-field Test )是評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在新異環(huán)境中自主行為、探究行為與緊張度的一種方法。以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在陌生環(huán)境中某些行為的發(fā)生頻率和持續(xù)時(shí)間來(lái)反應(yīng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的自主行為與探究行為,以尿便次數(shù)反應(yīng)其緊張度。敞箱實(shí)驗(yàn)(Open-field Test):木質(zhì)敞箱,立方形,長(zhǎng)、寬、高為80cm x 80cm x 40cm,內(nèi)側(cè)壁、底面為黑色,底面用白線(xiàn)劃分為面積相等的25塊正方形。室內(nèi)安靜環(huán)境下將大鼠放置于敞箱底面的中心方格內(nèi),人距離敞箱1米之外,記錄大鼠在3 min內(nèi)活動(dòng)頻率。以穿越底面正方形塊數(shù)為水平穿越格數(shù)(4爪均進(jìn)入方格才記數(shù),為水平運(yùn)動(dòng)得分)、以?xún)珊笾绷⒌拇螖?shù)為豎立活動(dòng)次數(shù)(兩前爪騰空或攀附墻壁,為垂直運(yùn)動(dòng)得分),理毛次數(shù)以及大小便次數(shù)。每只動(dòng)物只測(cè)1次,測(cè)定完畢后徹底清潔敞箱再進(jìn)行下一只觀察。分別于實(shí)驗(yàn)前1天、實(shí)驗(yàn)第22天和最后1天進(jìn)行。
4.4 Morris 水迷宮實(shí)驗(yàn)
該實(shí)驗(yàn)是對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的檢測(cè)，主要包括定位航行實(shí)驗(yàn)和空間搜索實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)用主要裝置包括一個(gè)銀灰色圓形水池(直徑 150cm)，一個(gè)白色平臺(tái)(直徑10cm)，一臺(tái)跟蹤攝像機(jī)以及與攝像機(jī)相連的計(jì)算機(jī)，池內(nèi)盛水，且水溫保持在 22-24℃。最后一次敞箱實(shí)驗(yàn)結(jié)束后第二天開(kāi)始，首先訓(xùn)練大鼠尋找平臺(tái)，平臺(tái)置于水面下 2cm，攝像機(jī)位于水池上方約 200cm，能清晰攝取到大鼠的運(yùn)動(dòng)軌跡。將水池分為四個(gè)象限，將大鼠從任意一個(gè)象限放入水中，記錄其找到平臺(tái)的路徑及時(shí)間，前幾次訓(xùn)練中，若時(shí)間超過(guò) 120s，則引導(dǎo)動(dòng)物到平臺(tái)，并在平臺(tái)上停留10s。然后進(jìn)行定位航行與空間搜索實(shí)驗(yàn)。定位航行實(shí)驗(yàn)：訓(xùn)練結(jié)束后的第一天，保持平臺(tái)位置不動(dòng)，將大鼠隨機(jī)從一個(gè)象限放入水中，開(kāi)始記錄大鼠的運(yùn)動(dòng)軌跡及找到平臺(tái)的時(shí)間;空間搜索實(shí)驗(yàn)：定位航行實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，將平臺(tái)撤走，將動(dòng)物從原平臺(tái)位置的對(duì)側(cè)放入，開(kāi)始記錄 120s 內(nèi)大鼠的運(yùn)動(dòng)軌跡及潛伏期與穿越平臺(tái)次數(shù)。以此做為對(duì)空間記憶能力的檢測(cè)指標(biāo)。
4.4 懸尾實(shí)驗(yàn)
將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物通過(guò)固定動(dòng)物尾端2cm處使其頭向下懸掛，動(dòng)物在該環(huán)境中拼命掙扎試圖逃跑又無(wú)法逃脫，從而提供了一個(gè)無(wú)可回避的壓迫環(huán)境，一段時(shí)間的實(shí)驗(yàn)后，記錄處于該環(huán)境的動(dòng)物產(chǎn)生絕望的不動(dòng)狀態(tài)的時(shí)間。動(dòng)物表現(xiàn)出的這種典型的“不動(dòng)狀態(tài)”，反映了一種被稱(chēng)之為“行為絕望狀態(tài)”，這種行為絕望模型與抑郁癥類(lèi)似，而且對(duì)絕大多數(shù)抗抑郁藥物敏感，而且其藥效與臨床藥效顯著相關(guān)。
5.尼氏染色
正常的神經(jīng)細(xì)胞都含有一定數(shù)量的尼氏小體，它們主要分布于神經(jīng)細(xì)胞的漿中，形狀有大有小，如三角形，有的為橢圓形。這些物質(zhì)能被大部分的藍(lán)色染料所染色，這些染料如焦油堅(jiān)牢紫(Cresyl fast violet)、亞甲藍(lán)(methylene blue)、甲苯胺藍(lán)(toluidine blue)、硫董(thionin)等將其染為藍(lán)色。但是，當(dāng)神經(jīng)細(xì)胞受傷后，胞質(zhì)內(nèi)的尼氏體更可發(fā)生變化，嚴(yán)重的可消失，通過(guò)觀察尼氏小體的數(shù)量可以探知神經(jīng)元的受損或修復(fù)情況。
各組大鼠分別于末次給藥后麻醉,使大鼠仰臥位固定于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,打開(kāi)腹腔,掀起右肺,在靠近脊柱處找出下腔靜脈和腹主動(dòng)脈。用止血鉗夾住腹主動(dòng)脈和下腔靜脈,接著打開(kāi)胸腔,用針頭經(jīng)左心室插入升主動(dòng)脈,后剪開(kāi)右心耳,進(jìn)行灌注。先用0.9%的生理鹽水250ml經(jīng)心臟快速灌注沖洗,再用4%的低聚甲醛,O.lmol/L的磷酸緩沖液(PH7.2-7.4)350ml灌注。在灌注固定液過(guò)程中后期大鼠頸部、肩部和雙前肢逐漸變硬。灌注后取大鼠全腦,10%低聚甲醛固定48-60h。以松果體為標(biāo)志物,向頭側(cè)橫向切取3段,每段厚2mm。石蠟包埋,連續(xù)切片,片厚lOpin,切片,用于尼氏染色及后期的免疫組化。
將腦片置于0.5%甲苯胺藍(lán)(母液：甲苯胺藍(lán)1g，無(wú)水乙醇100ml。使用時(shí)按1:1比例與新鮮的0.1%NaCl溶液混合成工作液)或焦油紫(焦油紫0.1g;蒸餾水99ml;1%冰醋酸1ml)中室溫下染色30min。在75%、95%、100%酒精中各脫色1min，二甲苯透明10min，中性樹(shù)膠封片。顯微鏡下觀察照相并對(duì)尼氏染色陽(yáng)性神經(jīng)元進(jìn)行計(jì)數(shù)。
6.測(cè)量生化指標(biāo)
主要包括CREB、BDNF mRNA在大鼠海馬內(nèi)的表達(dá);免疫組化檢測(cè)TrKB、ERK1/2蛋白的表達(dá);免疫印跡法檢查CaM、CaMKⅡ的表達(dá)。
6.1逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法檢測(cè)CREB、BDNFmRNA在大鼠海馬內(nèi)的表達(dá) 首先勻漿：海馬新鮮組織約100mg,加入1ml的TRIZOL試劑,用電動(dòng)勾漿器進(jìn)行勾漿;兩相分離:分裝后樣品于15到30℃孵育5分鐘。每1ml的TRIZOL試劑勾漿的樣品中加入0.2 ml的氯仿,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15-30℃孵育2到3分鐘。4℃下120xx g離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色紛氯仿相,中間層核上層的無(wú)色的水相。RNA全部被分配于水相中,水相的體積大約是勾漿時(shí)加入的TRIZO試劑的60%;RNA沉淀:將水相轉(zhuǎn)移到新離心管中。水相與異丙醇混合以沉淀其中的RNA,加入異丙醇的量為每個(gè)樣品勻漿時(shí)加入，1mlTRIZOL試劑加0.5 ml的異丙醇，混勾后15-30℃孵育10分鐘后,于4℃ 12,000g離心10分鐘;RNA清洗:移去上清液,每1mlTRIZOL試劑勻漿的樣品中加入至少1ml的75%乙醇,清洗RNA沉淀。振蕩后,4℃，7500g離心5分鐘;重新溶解RNA況淀:去除乙醇溶液,空氣中干燥RNA沉淀5-10分鐘,切勿真空離心干燥，注意RNA沉淀不要完全干燥,否則將大大降低RNA的可溶性，部分溶解的RNA樣品A260/280比值將小于1.6;溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水用槍反復(fù)吹打幾次,然后55-60℃孵育10分鐘。莰得的RNA溶液保存于-70℃;濃度測(cè)定:取少量液體用TE稀釋(一般1: 100稀釋)后,讀取其在紫外分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,A260下讀值為1表示40ugRNA/ml;樣品RNA濃度(ug/ml)=A260×稀釋倍數(shù)40ug/ml;RNA純度檢測(cè):RNA溶液的A260/A280的比值范圍應(yīng)在1.8-2.1之間;
在無(wú)核酸酶的離心管中配制反應(yīng)液： RNA，1-5μg;逆轉(zhuǎn)錄引物 (20um)，1μl;RNase free H2O，使總體系為12.5μl(反應(yīng)液配制在冰上進(jìn)行)。輕輕混勻,65℃變性10min，立即置于冰上2min后加入：RNA-primer mix，12.5μl;5×RTReaction Buffer ，4μl;dNTP(10mM)，2μl;RiboLock RNase Inhibitor ，0.5μl;RevertAid Reverse Transcriptase，1μl。總體系20μl，25℃孵育10min后42℃孵育60min，70℃ 加熱滅活10 min，-20℃保存。 設(shè)計(jì)相應(yīng)的引物，配制成合適濃度工作液，Real time-PCR儀反應(yīng)體系液配制：2X all-in-OneTM qPCR Mix(含ROX)，10μl;引物(10pmol/μl)，上下游各0.4μl;ddH2O，4.2μl;cDNA(適度稀釋) ，5μl�？傮w系20μl。反應(yīng)條件：95℃，10min,以下反復(fù)40個(gè)循環(huán);95℃,10s;60℃，20s;72℃，20s。最后結(jié)果采用2-ΔΔCT法進(jìn)行測(cè)量。
6.2免疫組化法檢測(cè)TrKB、ERK1/2的表達(dá)
切片后,常規(guī)脫蠟至水;3%過(guò)氧化氫孵育lOmin,可以滅活內(nèi)源性酶的活性,蒸水沖洗,5minx3次;微波熱修復(fù)3min,PBS沖洗,5minx3次;滴加5%BSA封閉液,室溫孵育30min;滴加一抗,5-HTiaR 一抗稀釋為1:50,PKA稀釋為1:100,CREB稀釋為1:100,4°C過(guò)夜,PBS沖洗,5minx3次;滴加二抗生物素標(biāo)記的羊抗兔IgG,37°C孵育30min,PBS沖洗,5minx3次;滴加三抗試劑SABC,37°C孵育30min,PBS沖洗,5minx3次;DAB顯色劑顯色,室溫下15inin,蒸饋水沖洗,脫水,透明,封片最后DAB 顯色劑顯色，室溫下20min，蒸餾水終止反應(yīng)，常規(guī)脫水、透明、封片，顯微鏡下觀察。每只動(dòng)物取相同部位的3張切片，每張切片選取3個(gè)視野，在同一放大倍數(shù)、同一光強(qiáng)度下，采用CMLAS 彩色病理圖像分析系統(tǒng)，分別計(jì)算每張切片中海馬組織TrKB、ERK1/2表達(dá)的平均光密度。
6.3免疫印跡法測(cè)定鈣調(diào)素(CaM)、鈣調(diào)蛋白激酶(CaMKⅡ)蛋白表達(dá)變化
取新鮮海馬約100mg置1.5mlEP管中，生理鹽水沖洗兩遍，充分剪碎，離心去上清。每管加4℃裂解液1ml，繼續(xù)剪碎、混勻，低溫超聲勻漿;14000轉(zhuǎn)離心，5min，取上清備用。取上清5μl，加考馬斯亮藍(lán)3μl，去離子水95μl，595nm 處，1cm光徑，蒸餾水調(diào)零，測(cè)各管OD值;根據(jù)樣品OD值調(diào)整蛋白濃度。樣品煮沸5min，冷卻后取50μg上樣;電件(12%濃縮膠：90v30min;10%分離膠：120v120min);NC膜轉(zhuǎn)印(70v120min);5%脫脂奶粉TBST溶液封閉抗體，搖床2h，TBS漂洗5min，3次。一抗孵育(兔抗人CaM、CaMKⅡ多克隆抗體1:500稀釋)，4℃過(guò)夜;二抗孵育(辣根酶標(biāo)記羊抗兔IgG 1:1500稀釋)，37℃ 1h;掃描并分析結(jié)果，條件設(shè)置為曝光2min，CCD自動(dòng)獲取圖像，同時(shí)以1:1000稀釋的小鼠抗大鼠beta-actin單克隆抗體作為內(nèi)參照，各蛋白相對(duì)表達(dá)量以相應(yīng)蛋白/beta-actin灰度值表示。
九 課題創(chuàng)新性
1. 本課題首次系統(tǒng)地由宏觀到微觀地進(jìn)行綜合研究，能從行為學(xué)水平→細(xì)胞形態(tài)水平→分子水平三個(gè)層次經(jīng)行分析，以期待比較完善地探索百合知母湯抗抑郁功效及其機(jī)理。
2. 本課題選用了先進(jìn)的指標(biāo)，并且采用蛋白水平和mRNA水平檢測(cè)方法，檢測(cè)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子及相關(guān)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中關(guān)鍵因子的變化，以期探尋本方提高抑郁癥大鼠腦組織CREBmRNA的表達(dá)水平的進(jìn)一步信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制。
十 預(yù)期結(jié)果
1. 成功完成大鼠抑郁癥CUMS模型的建立，構(gòu)建良好的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。
2. 探討百合知母湯抗抑郁機(jī)制中三種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)發(fā)揮的作用，篩選百合知母湯抗抑郁的靶點(diǎn)通路。
3. 預(yù)計(jì)在國(guó)內(nèi)學(xué)術(shù)期刊上發(fā)表論文2篇。
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醫(yī)學(xué)課題開(kāi)題報(bào)告 3
選題背景和意義
選題背景
幾十年來(lái)，在計(jì)劃經(jīng)濟(jì)體制下，我國(guó)醫(yī)療服務(wù)屬福利化范疇;醫(yī)療服務(wù)市場(chǎng)化是在宏觀的市場(chǎng)化改革推動(dòng)下進(jìn)行的。隨著醫(yī)療體制改革的不斷深入，醫(yī)療服務(wù)具有市場(chǎng)的性質(zhì)已是不爭(zhēng)的事實(shí) 。加入WTO以后，醫(yī)療市場(chǎng)逐漸開(kāi)放，民營(yíng)醫(yī)院的迅速崛起，中外合資合作醫(yī)院的建立，醫(yī)療市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)日趨激烈。
作為省會(huì)城市，鄭州除了省市各級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)之外，還有很多不同種類(lèi)的專(zhuān)科醫(yī)院和專(zhuān)家門(mén)診，近年來(lái)，鄭州市醫(yī)療衛(wèi)生行業(yè)更是進(jìn)入快速發(fā)展階段，目前醫(yī)院總數(shù)已經(jīng)達(dá)到300余家。
作者在大三學(xué)習(xí)期間，承擔(dān)了河南省中醫(yī)院服務(wù)營(yíng)銷(xiāo)管理的研究，本文從服務(wù)質(zhì)量差距模型的角度，對(duì)醫(yī)院服務(wù)營(yíng)銷(xiāo)存在的問(wèn)題及應(yīng)對(duì)策略進(jìn)行分析。
選題意義
現(xiàn)實(shí)意義
通過(guò)對(duì)河南省中醫(yī)院200名患者服務(wù)滿(mǎn)意度調(diào)查，圍繞就醫(yī)環(huán)境、技術(shù)水平、服務(wù)態(tài)度、服務(wù)效率、服務(wù)收費(fèi)、醫(yī)德醫(yī)風(fēng)等6方面的分析，客觀公正地收集患者及家屬對(duì)醫(yī)院各方面的意見(jiàn)和建議，從而為科室考核、醫(yī)院的管理和發(fā)展提供可行的依據(jù)。
理論意義
河南省中醫(yī)院作為一家集醫(yī)療、教學(xué)、科研為一體的現(xiàn)代化綜合性三級(jí)甲等中醫(yī)院，目前在鄭州市醫(yī)療行業(yè)屬上游位置，通過(guò)對(duì)其服務(wù)質(zhì)量差距模型的分析，探究服務(wù)質(zhì)量差距產(chǎn)生的原因，并尋求應(yīng)對(duì)的措施，使每一位醫(yī)務(wù)工作者都樹(shù)立強(qiáng)烈的市場(chǎng)意識(shí)、服務(wù)意識(shí)、競(jìng)爭(zhēng)意識(shí)和營(yíng)銷(xiāo)意識(shí)，在全院建立起 醫(yī)療服務(wù)營(yíng)銷(xiāo) 模式，不但對(duì)自己是一個(gè)提高，同時(shí)也對(duì)河南省其他醫(yī)院的發(fā)展作出應(yīng)有的貢獻(xiàn)。
國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究綜述
目前國(guó)際上比較流行的是以下三種模型，當(dāng)然在服務(wù)營(yíng)銷(xiāo)領(lǐng)域，這三種理論模型并非全部，其它學(xué)者還提出了很多其它的理論模型，但這三種是最具影響和代表意義的，因?yàn)檫@三種模型無(wú)一例外地將研究的重點(diǎn)放在面對(duì)面的服務(wù)體驗(yàn)上。
服務(wù)體驗(yàn)及其構(gòu)成要素
任何服務(wù)體驗(yàn)都由四個(gè)要素構(gòu)成：1)服務(wù)員工;2)服務(wù)設(shè)施;3)服務(wù)顧客;4)服務(wù)過(guò)程。盡管各種服務(wù)體驗(yàn)都包括這四種要素，但四要素對(duì)服務(wù)體驗(yàn)的貢獻(xiàn)程度卻因服務(wù)而異。譬如，在一些服務(wù)體驗(yàn)中，員工就扮演著不太重要的角色，例如相對(duì)于牙醫(yī)來(lái)說(shuō)，電影院工作人員對(duì)觀眾欣賞影片的影響就很小。
員工既包括那些與顧客直接接觸的人(如服務(wù)生、出納等)，也包括那些雖在顧客的視線(xiàn)之外，但同樣為服務(wù)的提供做出貢獻(xiàn)的組織成員(如廚師、銀行會(huì)計(jì)等)。服務(wù)設(shè)施既包括顧客所能接觸到的設(shè)施，(如餐廳、銀行大廳等)，也包括那些顧客一般很少接近的設(shè)施(如飯店的廚房、銀行的保險(xiǎn)柜等)。顧客是指服務(wù)的接受人(如用餐人、存款人等)與那些與其共享服務(wù)設(shè)施的人。最后，服務(wù)過(guò)程是指為提供服務(wù)而從事的一系列活動(dòng)(即在用餐或存款時(shí)，顧客與服務(wù)組織所采取的各種行動(dòng))的活動(dòng)順序。
服務(wù)體驗(yàn)的四個(gè)構(gòu)成要素，皆在服務(wù)體驗(yàn)的形成過(guò)程中扮演著重要的角色。然而，對(duì)不同的服務(wù)互動(dòng)過(guò)程而言，并非所有的服務(wù)體驗(yàn)構(gòu)成要素皆對(duì)服務(wù)體驗(yàn)施加同等重要的影響。為兼容這些特殊情況，任何服務(wù)體驗(yàn)分析框架都應(yīng)允許各構(gòu)成要素的重要性有所不同。
服務(wù)營(yíng)銷(xiāo)組合理論
營(yíng)銷(xiāo)組合，是指組織在識(shí)別可控制營(yíng)銷(xiāo)因素的基礎(chǔ)上，根據(jù)顧客的需求來(lái)確立營(yíng)銷(xiāo)因素的最佳組合。早期的營(yíng)銷(xiāo)理論，幾乎皆由營(yíng)銷(xiāo)組合概念來(lái)驅(qū)動(dòng)。在有關(guān)營(yíng)銷(xiāo)組合的諸多觀點(diǎn)中，最具影響力的當(dāng)屬 4Ps 營(yíng)銷(xiāo)組合，其中的 4P 分別為產(chǎn)品(product)、價(jià)格(price)、促銷(xiāo)(promotion)與地點(diǎn)(place)。Booms與Bitner(1981)建議，對(duì)服務(wù)組織來(lái)說(shuō)，應(yīng)在 4P 的基礎(chǔ)上增加另外三種營(yíng)銷(xiāo)因素，即參與者(participants)、有形證據(jù)(physical evidence)和服務(wù)裝配過(guò)程(process of service assembly)，故服務(wù)營(yíng)銷(xiāo)組合就是在傳統(tǒng)的 4Ps 營(yíng)銷(xiāo)組合的基礎(chǔ)上增加上述3 Ps。服務(wù)營(yíng)銷(xiāo)組合中所新增加的 3P ，抓住了服務(wù)營(yíng)銷(xiāo)的本質(zhì)，指明了服務(wù)產(chǎn)品與有形產(chǎn)品的差別，也為我們提供了 一種剖析服務(wù)體驗(yàn)及其構(gòu)成要素的理論模型。
參與者是指卷入服務(wù)產(chǎn)出過(guò)程的所有人，不僅包括顧客，而且包括員工。有形證據(jù)是指服務(wù)環(huán)境以及服務(wù)的其他有形層面。服務(wù)裝配過(guò)程是指為提供服務(wù)而發(fā)生的一系列活動(dòng)及其發(fā)生順序。對(duì)任何服務(wù)而言，新增加的`每一種營(yíng)銷(xiāo)因素都會(huì)影響顧客對(duì)服務(wù)的總體感覺(jué)。因此，意欲針對(duì)具體細(xì)分市場(chǎng)拓展服務(wù)業(yè)務(wù)的組織，可根據(jù)目標(biāo)顧客的特點(diǎn)來(lái)調(diào)整其中的一種或多種營(yíng)銷(xiāo)因素，以突出服務(wù)特色。服務(wù)特色可來(lái)自于有形證據(jù)。同樣，一個(gè)服務(wù)組織也可借助服務(wù)參與者的調(diào)整來(lái)差別化它的服務(wù)。與傳統(tǒng)的 4P 一樣，新加入的 3p 之間也存在多重聯(lián)系。強(qiáng)化其中的一個(gè)營(yíng)銷(xiāo)因素以影響顧客的消費(fèi)感覺(jué)，則可能需要或引發(fā)其它營(yíng)銷(xiāo)因素的變化。
總之，服務(wù)營(yíng)銷(xiāo)組合模型識(shí)別融入3個(gè)新的營(yíng)銷(xiāo)因素，而此 3P 對(duì)營(yíng)銷(xiāo)一種服務(wù)時(shí)非常重要。服務(wù)營(yíng)銷(xiāo)組合模型的優(yōu)勢(shì)之一，是其建立在營(yíng)銷(xiāo)組合這一較為成熟的營(yíng)銷(xiāo)概念之上，既突出了這一理論模型的正統(tǒng)性，又強(qiáng)調(diào)了服務(wù)營(yíng)銷(xiāo)與有形產(chǎn)品營(yíng)銷(xiāo)的差別之處。
服務(wù)劇場(chǎng)模型
把服務(wù)比作一場(chǎng)戲劇，服務(wù)劇場(chǎng)模型(Grove and Fisk，1983，1992)擁有與舞臺(tái)產(chǎn)品一樣的構(gòu)成要素：演員、觀眾、設(shè)施、前臺(tái)、后臺(tái)與表演。
研究?jī)?nèi)容、重點(diǎn)和難點(diǎn)
研究的基本思路和框架
本文以河南省中醫(yī)院服務(wù)滿(mǎn)意度調(diào)查問(wèn)卷分析出的問(wèn)題為出發(fā)點(diǎn)，運(yùn)用服務(wù)質(zhì)量差距模型，分析導(dǎo)致提供服務(wù)失敗最可能出現(xiàn)的5種差距，幫助醫(yī)院管理者發(fā)現(xiàn)服務(wù)質(zhì)量問(wèn)題的根源，努力消除那些存在的差距，提高醫(yī)院醫(yī)療服務(wù)質(zhì)量。
醫(yī)學(xué)課題開(kāi)題報(bào)告 4
論文(設(shè)計(jì))題目：
抗炎受試物A對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型的影響
背景與意義
炎癥性腸病(IBD，Inflammatory bowel disease)是一組原因未明的慢性腸道炎癥性疾病，包括潰瘍性結(jié)腸炎(UC，ulcerative colitis)和克羅恩病(CD，Crohn’s disease)。
大約10%的結(jié)腸炎癥尚不能區(qū)分是CD或UC，在西方國(guó)家稱(chēng)為不明確的結(jié)腸炎。
有專(zhuān)業(yè)醫(yī)學(xué)調(diào)查機(jī)構(gòu)經(jīng)過(guò)隨訪跟蹤研究，發(fā)現(xiàn)這些不明確結(jié)腸炎患者大多數(shù)發(fā)展稱(chēng)為UC，其臨床癥狀多樣化，但以腹痛、腹瀉為主要腸道癥狀，病變可累及胃腸道任一部位，但結(jié)腸被侵犯最多。
隨著我國(guó)人民生活水平的不斷提高，人民的生活習(xí)慣出現(xiàn)了質(zhì)的變化，快速的生活節(jié)奏成為現(xiàn)今社會(huì)的主旋律，然而我國(guó)炎癥性腸病病人近年來(lái)的發(fā)病率亦不斷上升，但正因此潰瘍性結(jié)腸炎是一種原因未明的結(jié)直腸炎性病變，隨著病程延長(zhǎng)，倘若得不到針對(duì)性的治療，病程會(huì)不斷的加重，且癌變風(fēng)險(xiǎn)也隨之增加。
但目前由于潰瘍性結(jié)腸炎臨床病例積累需較長(zhǎng)的時(shí)間，存在一定難度，建立潰瘍性結(jié)腸炎的動(dòng)物模型起到了重要作用。
目前關(guān)于潰瘍性結(jié)腸炎動(dòng)物模型較多，近年來(lái)，有研究者發(fā)現(xiàn)，使用TNBS誘發(fā)潰殤性結(jié)腸炎動(dòng)物模型，造模成功率高，而且造模成功的動(dòng)物模型出現(xiàn)自愈的現(xiàn)象低，動(dòng)物模型的病癥癥狀與人類(lèi)癥狀相似。
通常情況下，TNBS用量為100~150 mg/kg體重，濃度在50%以上的乙醇為4~5ml/kg體重。
采用本方法復(fù)制的模型，動(dòng)物結(jié)腸炎癥和潰殤至少維持7~8周。
其中，1~3周為急性期改變，以中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)為主;4~8周為慢性炎癥改變，浸潤(rùn)細(xì)胞主要為淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞。
病理改變主要表現(xiàn)為結(jié)腸組織潰殤形成，腸壁增厚，教膜及黠膜下層大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，肉芽組織及隱窩版腫形成。
在檢測(cè)項(xiàng)目中，本模型采用的中性粒細(xì)胞髓過(guò)氧化物酶MPO是近年來(lái)臨床廣泛采用的一種診斷指標(biāo)。
在急性炎癥期，腸壁主要為中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，故MPO活性增加;炎癥向慢性轉(zhuǎn)化后，則以淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)為主，MPO活性即明顯下降活性與結(jié)腸急性炎癥的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，是評(píng)價(jià)急性期嚴(yán)重程度及鑒別急、慢性炎癥的重要指標(biāo)之一。
在第一階段的動(dòng)物造模成功后，論文實(shí)驗(yàn)的第二階段就是藥物治療階段。
本論文實(shí)驗(yàn)選擇治療潰瘍性結(jié)腸炎模型動(dòng)物的.藥物是受試物A，對(duì)腸壁的炎癥有顯著的抑制作用，但是，因?yàn)閷?zhuān)利版權(quán)等因素，抗炎受試物A的相關(guān)信息不可公布。
研究目的
本論文研究中，我們通過(guò)注射100mg/kg體重的TNBS乙醇溶液建立潰瘍性結(jié)腸炎的動(dòng)物模型，然后對(duì)造模成功的動(dòng)物進(jìn)行抗炎受試物的治療，得到相關(guān)的數(shù)據(jù)結(jié)論，并初步探究潰瘍性結(jié)腸炎相關(guān)病癥癥狀及發(fā)病機(jī)制，與抗炎受試物對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎治療機(jī)制情況，以此為探究人類(lèi)潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病機(jī)制與治療機(jī)制提供一定的線(xiàn)索。
方案與材料
本論文選擇50只，180～200g SD雄性大鼠，使用TNBS乙醇溶液灌腸復(fù)制潰瘍性結(jié)腸炎模型。
將造模成功的大鼠隨機(jī)分為模型對(duì)照組，受試物低、高劑量組，陽(yáng)性對(duì)照組，10只/組，灌胃給藥，1次/d，連續(xù)10 d。
取結(jié)腸組織進(jìn)行MPO和病理檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)全過(guò)程與SPF級(jí)動(dòng)物房中進(jìn)行，所有實(shí)驗(yàn)環(huán)境與實(shí)驗(yàn)工具經(jīng)過(guò)嚴(yán)格消毒使用，相關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作經(jīng)過(guò)相關(guān)資質(zhì)人員培訓(xùn)并通過(guò)測(cè)試，并且符合國(guó)家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，這些實(shí)驗(yàn)條件由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物心提供。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，每天記錄大鼠體重、皮毛、精神狀態(tài)、排便情況及相關(guān)日常觀察。
實(shí)驗(yàn)結(jié)束前一天動(dòng)物禁食12h，不禁水。
處死大鼠，截取自肛門(mén)向上10 cm的結(jié)腸，沿腸系膜縱軸剪開(kāi)，用冰生理鹽水反復(fù)沖洗干凈，取一小部分肉眼觀察病變明顯的部位以福而馬林固定，進(jìn)行組織病理學(xué)檢查，另取一小部分肉眼病變明顯的部位-80℃凍存，每組隨機(jī)抽取6只動(dòng)物的標(biāo)本，檢測(cè)各結(jié)腸組織MPO的變化。
時(shí)間內(nèi)容備注
20xx0720~20xx0819資料積累、實(shí)驗(yàn)方案編寫(xiě)方案編寫(xiě)階段
20xx0820接收動(dòng)物、編號(hào)、稱(chēng)重造模階段
20xx0820~20xx0822檢疫觀察
20xx0823稱(chēng)重，禁食
20xx0824隨機(jī)分組，造模
20xx0828~20xx0907每天給藥、稱(chēng)重、觀察治療階段
20xx0908實(shí)驗(yàn)結(jié)束
20xx0909~20xx0914酶活性測(cè)定，病理測(cè)定檢測(cè)階段
20xx0915~20xx0920整理資料與數(shù)據(jù)，寫(xiě)報(bào)告結(jié)論分析階段
預(yù)期研究成果
1.深入認(rèn)識(shí)到潰瘍性結(jié)腸炎的致病機(jī)制，與該病癥的動(dòng)物相關(guān)造模方法及TNBS造模作用機(jī)制。
2.得到造模間與治療期間動(dòng)物相關(guān)體征數(shù)據(jù)，初步探索得潰瘍性結(jié)腸炎對(duì)動(dòng)物體征的具體影響，與治療藥物對(duì)病情的治療情況。
3.檢測(cè)出病變炎癥部位的病理情況，初步認(rèn)識(shí)到各程度潰瘍結(jié)腸炎對(duì)結(jié)腸的損傷程度的相關(guān)情況。
4.初步認(rèn)識(shí)MPO酶活性檢測(cè)的原理，與各程度潰瘍性結(jié)腸炎在MPO酶活性中的體現(xiàn)。
參考文獻(xiàn)
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7. MIC基因與潰瘍性結(jié)腸炎相關(guān)性的研究進(jìn)展。
醫(yī)學(xué)課題開(kāi)題報(bào)告 5
�。ㄒ唬┻x題背景
隨著科學(xué)技術(shù)的日新月異和生活水平的迅速提高，人們對(duì)于身體健康保障的要求越來(lái)越高。當(dāng)病人突出心臟病、腦溢血、低血糖、癲癇病等突發(fā)性疾病時(shí)，病人的生命安危將在很大程度上決定于病人能否在最短時(shí)間內(nèi)得到有效的救助。由此自然促進(jìn)了急救業(yè)務(wù)的發(fā)展和常用急救知識(shí)的普及。但是在國(guó)內(nèi)，整個(gè)急救體系還處于起步階段，存在的很多隱患可能在病人突發(fā)癥病后影響急救效率。例如，如果一個(gè)心臟病人在路邊散步時(shí)突然發(fā)病倒在路過(guò)該怎么辦？打電話(huà)？如果附近沒(méi)有公共電話(huà)呢？找人幫忙？一旦被非專(zhuān)業(yè)人員錯(cuò)誤處理，導(dǎo)致延誤治療很可能弄巧成拙。打車(chē)送醫(yī)院？資料表明，當(dāng)病人心跳停止后 5－10min腦細(xì)胞就開(kāi)始死亡。換句話(huà)說(shuō)：在這種情況下必須要讓專(zhuān)業(yè)急敵人員盡快到場(chǎng)才能保證病人的生命安全。從這個(gè)角度進(jìn)行思考，我提出了這么一個(gè)設(shè)想：能不能設(shè)計(jì)一種裝置使得病人因突然發(fā)病而跌倒到醫(yī)生趕到救治的過(guò)程得到盡快的簡(jiǎn)化呢？
我在專(zhuān)利局查閱有關(guān)資料之后，發(fā)現(xiàn)國(guó)內(nèi)目前尚沒(méi)有此類(lèi)產(chǎn)品的設(shè)計(jì)。一個(gè)類(lèi)似創(chuàng)意的設(shè)計(jì)是：在一個(gè)瓶子內(nèi)設(shè)置兩個(gè)金屬接點(diǎn)，瓶子內(nèi)部灌一些水銀。當(dāng)人站立時(shí)，水銀集中在一個(gè)接點(diǎn)處，電路斷開(kāi)。當(dāng)人倒地時(shí)，瓶子的傾斜使水銀同時(shí)接觸到2個(gè)接點(diǎn)，電路被觸發(fā)，瓶子內(nèi)置的警報(bào)器發(fā)出警報(bào)，示意求助。這個(gè)設(shè)計(jì)顯然是很粗糙的。
�。�1）它只是通過(guò)身體傾斜的角度來(lái)決定是否報(bào)警，而不是按照真正的生理狀況，必然會(huì)出現(xiàn)很高的誤報(bào)率。
�。�2）它無(wú)非是在最短時(shí)間內(nèi)引起了別人注意，卻并沒(méi)有使整個(gè)過(guò)程簡(jiǎn)化，所以對(duì)于提高救護(hù)效率不會(huì)起到實(shí)質(zhì)影響。
結(jié)合我自己的設(shè)想和現(xiàn)有設(shè)施的缺陷，我希望做出一套“倒地后急救體系”：當(dāng)病人倒地之后，用一個(gè)監(jiān)測(cè)裝置感知病人諸如血壓、脈搏等生理狀況并進(jìn)行數(shù)值分析。一旦確定病人已經(jīng)發(fā)病，就發(fā)出無(wú)線(xiàn)電信號(hào)給最近的'急救站，急救站通過(guò)GPS定位病人的位置并以最快的速度調(diào)度急救人員。
但是，經(jīng)過(guò)兩個(gè)多月的探討，幾乎沒(méi)有任何進(jìn)展，我?guī)缀醯搅艘艞壍牡夭�。但是，在老師不斷的鼓�?lì)和啟發(fā)下，有一天，靈感幸運(yùn)地光顧了我的大腦——聲光求助，有線(xiàn)、無(wú)線(xiàn)電話(huà)報(bào)警都是成熟的技術(shù)，關(guān)鍵在于沒(méi)有一個(gè)能判斷病人因其他原因跌倒與突然發(fā)病而跌倒的智能開(kāi)關(guān)裝置。
一旦這個(gè)設(shè)計(jì)能夠?qū)崿F(xiàn)，將會(huì)具有重大的實(shí)際價(jià)值和社會(huì)價(jià)值。首先它使病人在急救最關(guān)鍵的一個(gè)環(huán)節(jié)上得到了最大的保障，很大程度降低了突發(fā)性疾病的危險(xiǎn)性；其次，它會(huì)使急救行業(yè)出現(xiàn)新的概念、新的運(yùn)營(yíng)模式，也會(huì)促進(jìn)相關(guān)產(chǎn)品（如GPS）的普及和推廣；另外，它可以使眾多患有突發(fā)性疾病的中老年人以輕松、樂(lè)觀的情緒面對(duì)生活，參與更多的社會(huì)活動(dòng)，由此產(chǎn)生的社會(huì)效應(yīng)將非�？捎^。
（二）研究方案
縱觀整個(gè)設(shè)計(jì)思路，大致可分為三大部分
第一階段：到醫(yī)院進(jìn)一步收集有關(guān)病人（尤其是老年人）發(fā)病摔倒時(shí)候的具體生理反應(yīng)的資料，比如倒地姿勢(shì)，血壓、脈搏的變化狀況等。這一階段的關(guān)鍵任務(wù)就是要通過(guò)資料分析抓住普通狀況下摔倒和因病倒地的不同。而資料估計(jì)將以心電圖和血壓數(shù)值的收集為重點(diǎn)。
第二階段：選擇適當(dāng)?shù)姆绞浇邮账璧纳硇盘?hào)。這一階段的關(guān)鍵在于選擇適當(dāng)?shù)膫鞲衅饕越邮障鄬?duì)微弱的生理信號(hào)。估計(jì)這一階段要考慮的問(wèn)題是選擇什么性能的傳感器和如何分布傳感器，以達(dá)到最理想的試驗(yàn)效果。
第三階段：設(shè)計(jì)分析電路。這一階段的任務(wù)就是要通過(guò)邏輯電路對(duì)傳感器接收的電信號(hào)進(jìn)行分析以判斷使用者身體狀況是否正常。主要難點(diǎn)就在于如何找到一個(gè)適當(dāng)?shù)臄?shù)學(xué)模型匹配實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和如何把模型通過(guò)電路實(shí)現(xiàn)。目前主要有兩大實(shí)施方案：一是通過(guò)邏輯電路進(jìn)行信號(hào)運(yùn)算、識(shí)別；二是使用單片機(jī)編程識(shí)別。第一種方案的好處是處理問(wèn)題直接，但當(dāng)需要處理的信號(hào)相當(dāng)復(fù)雜時(shí)，依靠單片機(jī)編程就顯得比較合適。選取哪種方案還要視具體情況而定。
第四階段：把以上各階段結(jié)果整合到一起，完成成品。
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